改良台氏液(无钙镁)，AB64187-500ml

Trizol改良方法总结

③ 4℃、12000r/min离心15min，上层水相，+等体积的异丙醇，混匀，4℃静置10min ④ 4℃、12000r/min离心10min，弃上清，沉淀经20ml 75%乙醇洗涤2次，晾干，500μL DEPC水溶解RNA 改良： a. 加入氯仿前添加5M NaCl高盐溶液4ml，摇匀 b. 在沉淀RNA之前加入等体积的酚：氯仿：异戊醇(25:24:1)，混匀，RT 5min，4℃、12000r/min离心

给大家提供一个改良RIPA的配方

在园子里讨论RIPA的很多，但仅仅只有最终物质的量浓度，要具体配制时还要换算成质量单位，十分不便。我在网上搜到了相应的改良RIPA的具体配法，希望能够有用。下面的内容将RIPA的基本配方、蛋白酶抑制剂配方以及磷酸酶抑制剂配方分开，对于有机会直接买蛋白酶抑制剂cocktail以及做磷酸化的战友而言十分方便。那样的话只需配制基本配方即可。 Preparation of Modifed Radioimmunoprecipitation (RIPA) Buffer RIPA Base

（交流）如何提高改良ELISA的灵敏度

请规范发贴，谢谢合作。应用改良ELISA法检测某蛋白，购买标准的抗原肽，分子量比较小，直接包被标准的抗原肽，浓度已经达到了100ng/ml水平，过夜后经过洗涤，然后加入一抗，为纯化的IgG，浓度也比较高，为μg/ml水平，按着标准抗原肽和IgG的分子量来计算质量浓度，一抗应当足够和抗原肽结合了。加入一抗后37℃温育2h，洗涤，然后加入标记物（二抗），37℃温育1h，洗涤，再加入TMP底物A和底物B，显色反应20min，加入反应中止液，中止反应后在酶标仪上于450nm处测定OD值。OD值显示