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联硕生物
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500ml
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文献和实验我做NF-kB的EMSA实验方法和结果,条带不好,请大家指点!
核蛋白提取: (1)5 millions个离心收集 (2)弃上清,细胞沉淀重悬于1.5ml冰预冷的PBS缓冲液,4℃下2000 rpm离心5min。 (3)弃上清,沉淀重悬于500μl冰预冷的Buffer A离心收集,再悬于0.5 ml Buffer A。 (4)冰上放置10分钟,加入NP40使终浓度为0.5%,混匀后,轻摇20秒。 (5)4℃下1330×g离心15分钟得到细胞核。 (6)重悬于50µl Buffer B,于冰上强烈振荡15分钟,4℃下16300×g离心10分钟
,使用 1 mL 移液器吸出上层较小颗粒,继续剪碎组织,重复加入1640基础培养基,直至所有的组织大小均符合要求。 将肿瘤组织悬液转移至 50 mL 离心管中,加入 1640 基础培养基,250 g离心5 min,弃上清,加入4.5 mL 的 1640 基础培养基,重悬细胞沉淀并转移至培养皿中。 加入 500 μL 的 10×Triple Enzyme stock solution 混合酶溶液,轻轻吹打至充分混匀,转移至37℃水浴摇床消化孵育 1~2 h。 消化结束后用 1640 基础培养
人血小板衍化生长因子AB(PDGF-AB)ELISA试剂盒 说明书
液 19 0ul,稀释 2 0倍)。 2. 标准品液配制:使用前加入4ml 蒸馏水 混匀,配成 2 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管,第一管加标本稀释液 900ul ,第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在第一管中加入 2 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ,移至第二 管 。如此反复作对倍稀释,从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。 3. 10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释
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![3-[[4-(2-Fluorophenyl)-1-piperazinyl]methyl]-4-methoxy-benzaldehyde,AB66875-250mg](https://img1.dxycdn.com/p/s14/2025/0814/021/0698067134105685591.jpg!wh200)

