3,4-二香草基四氢呋喃，AB62569-5mg

胶体金标记物的制备

沉淀：长期低温保存的蛋白质或4℃较长时间保存的抗体，特别是在浓度高于2mg/ml的情况下，很容易形成聚合物，聚合物对标记过程及免疫金探针的稳定性有一定影响，因此，标记之前须离心以除去这些聚合物。一般以100000r/min 4℃离心60min取上清液，调整蛋白质浓度至1mg./ml即可用于标记。二、胶体金pH值的调整胶体金与蛋白质的结合成功与否，取决于pH值，一般只有在蛋白质等电点（PI）略偏碱的条件下二者才能牢固地结合，因此，标记之前须将胶体金溶液的pH值调至待标记蛋白质的等电点略偏碱。需要提高

ICC用细胞抗原的制备

。 3、诱导液(TPA)：12-邻-十四酰-佛波醇-13-乙酸酯(12-O-tetradecanoyl-phorbol-13-acetate,TPA)溶于丙酮，配成20mg/ml。                                        二、实验步骤    (一)        、用96孔细胞培养板制备贴壁细胞抗原(正常贴壁细胞)         1、HFF,NIH3T3细胞用含10%血清DMEM完全培养液在75cm2培养瓶中单层培养,使密度达到90%  

免疫细胞化学染色操作规程

抗原玻片及96孔细胞抗原板（见ICC protocol 04） 12、封片液：1克明胶，溶于30ml 350C水中，加入35ml        甘油（或用甘油封片）和650mg石碳酸（先溶于0.6ml水中）。 二、细胞内源过氧化物酶阻断（使用HRP标记二抗或SP法时必须阻断） 1、从冰箱取出细胞片或细胞板，置室温或370C 10-15分钟，使恢复温度。 2、加3%H2O2，细胞片20ul/孔，培养板100ul/孔，使充分覆盖住细胞。 3、室温10分钟后，甩掉H2O2，用PBS