N-苯甲酰-L-酪氨酸，AB67523-1g

解离常数 dissociation constant

　　当由 A和 B组成复合物 AB存在 ABA B这样的解离平衡时，如 常数。对溶液中的反应， K主要是温度的函数。 A是酶， B是基质时，解离常数用 Ks表示； AB是酸， B是在 H 时的解离常数，用 Ka表示。无论哪种情况， -RTlnK都等于这个解离反应的标准自由能的变化量△ G°。象上述的情况，复合物解离为两种分子，且 [A]=[AB]，即 A种分子的一半与 B结合，此时 B的浓度就等于解离平衡常数。对酸解离的情况，用 pKa=-log10 Ka

便于N-糖分析的单次用和高通量HILIC SPE及IgG对照标准品

蛋白 中N-糖的常规应用方法包括：通过PNGase F释放出多聚糖，采用具有荧光活性的2-氨基苯甲酰胺(2-AB)进行标记，然后采用亲水作用色谱法(HILIC)进行分离，最后由荧光检测器(FLR)进行检测(图1)。此工作流程中，比较复杂的是样品制备步骤。为使此过程更加直观，沃特世(Waters® )推出了GlycoWorks，将N-糖制备与分析 所需的诸多耗材组合在一起。最值得注意的是，GlycoWorks实现了HILIC SPE的前/后标记纯化步骤，这对于确保方法的稳定性而言非常重要。

优化的GlycoWorks HILIC SPE流程用于mAb型样品中N-糖的定量与稳定回收

过程中发挥着重要作用。治疗性抗体是一类受糖基化影响突出的蛋白质，此类抗体中多聚糖图谱的改变可能导致其效能和免疫原性出现明显降低。因此，治疗性抗体的多聚糖图谱在 细胞 系选育过程中通常被作为关键性质量属性(CQA)进行评估，并且在开发和批量放行过程中必须进行监测。一套用于评价糖蛋白中N-糖的高效分析平台包括：通过PNGase F释放出多聚糖，采用具有荧光活性的2-氨基苯甲酰胺(2-AB)进行标记，然后采用亲水作用色谱法(HILIC)进行分离，最后由荧光检测器(FLR)进行检测。 下载完整