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文献和实验在溶剂中一周,就可以得到透明的脑组织,但是组织膨胀率高达 10%-30%。尿素溶液处理固定的脑组织,通过水合作用使组织透明,但相应的组织略膨胀,后续用 ScaleA2 溶液继续处理,ScaleA2 溶液包含 4M 尿素,10%(wt / vol)甘油和 0.1%(wt / vol)Triton X-100 组成。甘油可以防止过多的水合作用并使组织扩张最小化。在 ScaleA2 溶液中孵育完整的固定小鼠大脑,孵育时间 2 周以上可充分清除脑组织。在有图案的背景下或通过 532 nm 激光的穿透,透明
物被固定在载体上,而游离的标记物留于溶液中。这样可以通过洗涤将游离的 Ab※ 除去,结合标记物的测定可在固相上进行。 6. 酶免疫测定 酶免疫测定(enzymeimmunoassay)可分为均相(homogenous)和非均相(heterogenous)两种类型。在均相 EIA 中可不进行游离的和结合的标记物的分离而直接测定标记物。例如在某种条件下,抗原抗体反应后形成的酶标记抗原抗体复合物中的酶失去其对底物作用的活力,因而测出的酶活力直接反映游离的酶标记物。均相 EIA 在临床检验中较少应用
-1 pH 8.6的巴比妥缓冲液 称15.6 g巴比妥钠溶于900 m1蒸馏水中,用6 mol·L -1 HCl pH到8.6,加0.1 g叠氮钠,0.5 g牛血清蛋白,最后加蒸馏水至1000 m1。 (2)标准T4工作液 将不同量分装的标准冻干品5瓶,准确地用缓冲溶液(各瓶加0.5m1)稀释成为20、40、80、l60、320 ng·ml-1系列标准T4工作液,放4 ℃冰箱内备用。 (3)125I-T4应用液 将125I -T
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