番木鳖次碱，AB61780-5mg

胶体金标记物的制备

沉淀：长期低温保存的蛋白质或4℃较长时间保存的抗体，特别是在浓度高于2mg/ml的情况下，很容易形成聚合物，聚合物对标记过程及免疫金探针的稳定性有一定影响，因此，标记之前须离心以除去这些聚合物。一般以100000r/min 4℃离心60min取上清液，调整蛋白质浓度至1mg./ml即可用于标记。二、胶体金pH值的调整胶体金与蛋白质的结合成功与否，取决于pH值，一般只有在蛋白质等电点（PI）略偏碱的条件下二者才能牢固地结合，因此，标记之前须将胶体金溶液的pH值调至待标记蛋白质的等电点略偏碱。需要提高

Elabscience|肺泡巨噬细胞研究必看：LPS诱导急性肺炎模型制备与检测全攻略

）。 （5）推注完成后停留5-10 s，可轻按摩小鼠胸部，促进生理盐水与肺泡充分接触，随后轻柔回抽灌洗液。 （注：肺泡灌洗液自然回收率较低，通常为50%-70%，可重复灌洗3-4次；全程需将收集的灌洗液置于冰上保存，避免样本变质影响后续检测。） 3. 流式检测 1）将收集好的肺泡灌洗液300 × g离心3-5 min，离心完后去掉上清，留下白色沉淀。 （2）加入Cell Staining Buffer重悬，调整细胞密度至1×107/mL。 （3）取100 μL细胞悬液，加入CD16/32封闭抗体，轻轻

　胶体金标记物的制备

4℃离心60min取上清液，调整蛋白质浓度至1mg./ml即可用于标记。 二、胶体金pH值的调整 　　胶体金与蛋白质的结合成功与否，取决于pH值，一般只有在蛋白质等电点（PI）略偏碱的条件下二者才能牢固地结合，因此，标记之前须将胶体金溶液的pH值调至待标记蛋白质的等电点略偏碱。需要提高胶体金的pH值时可用0.1molK 2 CO 3 ，需要降低胶体金的pH值时可用0.1n HCl。测定金溶液的pH可能损害pH