牛肉浸粉（澄清），AB64716-250g

小鼠腹水及单细胞悬液制备及注意事项

科镊子提起腹膜，用 5mL 注射器往小鼠腹腔注射 2.5mL 预冷 PBS（勿扎到脏器），轻揉小鼠腹部1~2 min。注射器回抽腹腔灌洗液，收集于15mL 离心管中。 重复第 5 步 5 次，冲洗腹腔，可观察到冲洗液逐渐澄清。 将收集的腹腔灌洗液 300 g 离心 5 min，弃上清。 用细胞染色缓冲液或者含 10% 胎牛血清的 1640 培养液重悬细胞。 进行细胞计数，并调整细胞浓度至 1×107/mL。 注意事项： 若第 7 步离心弃上清后发现细胞沉淀中有较多红细胞，且检测目的细胞非红细胞，先

Nuclear fractionation protocol

实验试剂   1. Buffer A     10 mM HEPES, 1.5 mM MgCl2 , 10 mM KCl, 0.5 mM DTT,     0.05% NP40 (or 0.05% igepal or tergitol) pH 7.9     To prepare 250 ml stock of buffer A:     HEPES: 1M = 238.3 g/L, therefore 10 mM

Promega试剂盒抽提质粒遇到困难，紧急求教高手！

按一下步骤操作，连续两次均抽不出任何东西，请高手指点！ 抽提用作转染的重组质粒DNA(用5ml菌液) 所用试剂盒为Promega公司的Wizard○R Purefection Plasmid DNA Purification System，能够去除对细胞有害的细菌内毒素。具体操作步骤如下： （1） 将5ml 培养过夜的阳性菌在室温(24℃)下10000×g离心10 min。弃上清，将离心管倒置至吸水纸上去除剩余水分。 （2）加入250µl 重悬液，振荡至完全重悬。 （3）加入250µ