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文献和实验1ml RIPA buffer contains 35μl proteinase inhibitor(sigma cat no P8340) and 10μl phosphatase inhibitorRIPA buffer 最终浓度1M Tris-HCl pH7.5) 5 ml 50mMNaCl 0.87g 0.15 MNa-deoxycholale 0.1g (1%)0.5M EDTA(pH8.0) 0.8mlNaF 41 mgNonidet P40 1 ml (1%)Aprotinin
/ml 牛胰蛋白酶抑制剂 ( aprotinin ),1μg/ml亮抑蛋白酶肽 ( leupeptin )裂解液缓冲液:10mM Tris-HCl(pH7.4),0.15M NaCl,5mM EDTA(pH8.0),1%Triton×100;使用前加5mM DTT,0.1mM PMSF异丙醇和5mM ε-氨基己酸。2. 裂解液的制备A. 制备细胞裂解液:①收集胰蛋白酶消化的细胞并离心,用PBS清洗。②用100μl RIPA缓冲液冰浴溶解沉淀10min(每500000个细胞20μl RIPA缓冲
一、原理1949年Barr等发现,在雌性体细胞中的两条X染色体有一条(或这条的大部分)处于凝集不活动状态,从而形成X-小体(或称X-染色质、性染色质、Barr小体)。进而发现,所有哺乳类雌体细胞中都有一条这种表现的X染色体,当在个用雌或雄体中,有多于2条X染色体时,在间期细胞内除一条外,其余均形成X-小体。人类正常的男女体细胞中,22对常染色体并无区别,但其性染色体分别为XY和XX.女性的两条X染色体中,有一条在间期呈现浓缩状态,可由适当的染料显示。正常女性间期细胞中X小体阳性率约为30-50
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