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鹿森生物
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100ml
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文献和实验Phycoerythrin conjugation protocol
30 µl DTT (0.5M, i.e. 77 mg/ml in PBS). Incubate for 30 mins at room temperature. Separate derivatized PE and Ab from activators on G-10 columns. You should now have approximately 2 ml of each reactant. Mix derivatized
个细胞。考虑到我们后续还要对酶切用量进行优化,实际准备了足量细胞(每组约 1.5×107 个细胞)。在我们实验前,我们仔细观察了细胞的状态和密度,细胞状态很健康,贴壁良好,也达到了 80% 左右的汇合率,一切都符合 ChIP 实验的要求。拿出试剂盒,我们首先对各种标配试剂置于冰浴中进行了标记。由于试剂盒标配的 DTT 为干粉,因此我们需要配制 1M DTT 溶液(具体地,192.8 mg DTT#7016 加 1.12 ml dH2O,确保 DTT 完全溶解)。然后,我们取出并室温预热 200
小鼠腹水及单细胞悬液制备流程 配制 6% 淀粉肉汤。 6% 淀粉肉汤配制方法:牛肉膏 0.3g、蛋白胨 1.0g、氯化钠 0.5g、蒸馏水 100mL,上述材料混合加热后加入可溶性淀粉 6.0g;溶解后,121℃ 高压灭菌 15~20 min,EP 管分装封口,将肉汤放置于 4℃ 保存。 小鼠腹腔注射 1mL 6% 淀粉肉汤(注意避开肠管和内脏),刺激 60~72h。 颈椎脱臼法处死小鼠,用 75% 酒精浸泡小鼠 5min。 将小鼠置于解剖板中,固定四肢,剪开皮肤,充分暴露腹膜。 用眼
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