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-80℃
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6个月
- 英文名:
重组人IL-1α蛋白(E.coli)
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询问
- 供应商:
广州市左克生物
- 规格:
50 μg/支
产品简介:
品牌:Keygen/凯基生物
货号:KGD1341-50
产品名称:重组人IL-1α蛋白(E.coli) KGD1341-50
规格:50 μg/支
保质期:6个月
储存温度:-80℃
运输条件:干冰运输
品牌介绍:
江苏凯基生物技术股份有限公司,是一家深耕生命科学工具产品与服务、聚焦细胞生物学试剂产品、具备诊断产品临床、注册到商业转化能力的生命科学品牌供应商,依托细胞生物学、蛋白与免疫、分子生物学等关键核心技术,已形成完整的自主开发与产销体系,部分生物核心原材料“自主可控”,拥有知识产权90余项,通过ISO9001质量管理体系认证、ISO13485质量管理体系认证、GB/T29490知识产权管理体系认证,是国家专精特新小巨人企业、国家高新技术企业、国家科技部国际合作示范基地、江苏省科技型企业、江苏省生物试剂关键原料工程技术研究中心、江苏省生物医药核心材料绿色制造基地、江苏省服务型制造示范企业。明星产品线包括细胞培养基、无血清冻存液、细胞凋亡、细胞增殖检测试剂盒等。
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文献和实验的培养及鉴定 2.1 将PBMC按1-2 x 106/ml的浓度悬浮于无血清培养液中,加入1,000 U/ml 的重组人IFN-g,37oC,5%CO2培养箱中培养; 2.2 24h 后加入50ng/ml 的CD3 单克隆抗体和300 U/ml 的重组人IL-2,刺激CIK 细胞的生长和增殖; 注:此时也可同时加入100 U/ml的重组人IL-1a。 2.3 每3天半量换液或扩瓶一次,并补加重组人IL-2 300 U/ml; 2.4 在培养的第14d,收获CIK细胞。
包含体蛋白后,用稀释的办法进行复性,也可以利用凝胶过滤色谱进行复性(已有多种凝胶可以促进蛋白质的复性的报道)。以下以rhGM-CSF(重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子)的下游纯化工艺为例:E.coli细胞,超声破碎,离心收集包含体,用7mol/L盐酸胍溶解包含体蛋白,作1:70稀释使蛋白复性,加硫酸铵至一定浓度后,上样于Phenyl-Sepharose 6 FF(high sub)色谱柱,活性组分再上Q-Sepharose FF进行离子交换,最后上Superdex 75 prep grade凝胶进行凝胶过滤色谱
x 106/ml; 3.4 加入1 000 U/ml 的重组人IFN-g培养; 3.5 24h 后加入50ng/ml 的CD3 单克隆抗体和300 U/ml 的重组人IL-2,刺激CIK 细胞的生长和增殖; 注:此时也可同时加入100 U/ml的重组人IL-1a。 3.6 每3天半量换液或扩瓶一次,并补加重组人IL-2 300 U/ml; 3.7 在培养的第7d,收获CIK细胞,此时数量应达到1x 109个以上。 3.8 CIK细胞质控: 3.8.1 台盼蓝染色检测
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