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广州市左克生物
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盒
免疫荧光试剂包括:1. PBST 125ml,2. 4%多聚甲 醛,10ml;3.DapI染色液,3ml;4.TritonX-100,10ml;5. 1% BSA,10ml;6. CD31抗体20ul;7. vWF抗体,20ul; 8.红光二抗、绿光二抗,各20ul;
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文献和实验内皮细胞培养至90~100% ↓ PBS洗细胞3遍(室温) ↓ 预热的蛋氨酸和无血清的培养基(MEM)LL nL 50 μM(分子量,383.5,50 mM,25 mg 溶于二甲基硫氧化物DMSO中1304 μl) 在37℃下孵育2小时。 ↓ 等同于(同步)MEM加1.5%BSA+10 μM LLnL50 μM 在37℃下孵育10分钟。 ↓ 置于冰上,预冷PBS洗细胞3次 ↓ 37℃温育2分钟 ↓ 放射性标记:细胞在代谢中以100 μCi
和量化免疫细胞与肿瘤细胞之间的作用。A549肿瘤细胞(CytoLight Red荧光试剂标记)与预激活或未激活的PBMC共培养,加入Incucyte® FabFluor-488-α-CD45和Incucyte® Opti-Green试剂来标记淋巴细胞。加入PBMC 2小时后拍照显示CD45+细胞(绿色)和A549细胞(红色)之间的作用。相互作用(overlay,图示黄色mask)定量分析显示活化效应细胞与靶细胞的相互作用显著增加(结果见柱状图)。这一分析采用Incucyte® Cell
。 (2)有专门测定caspase-3活性的荧光试剂盒,应该比较便宜一些。 (3)rtpcr可以用来测定Bcl-2的表达,最好还是和WB结合使用。 (4)建议将caspase-3和caspase-9以及caspase-8的活性结合起来检测。 ylhuang0502 所以要看文献,做BCL-2,Bax和caspase-3的表达的文献可以说是成千上万,以后有问题最好先查文献,google/google scholar 和Pubmed就是很好的工具
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