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- 2026年01月07日
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青岛华晶生物技术有限公司
【产品名称】
革兰染色液
【包装规格】
单瓶（桶）包装规格为：20ml、50ml、100ml、250ml、500ml、1L、5L
每盒（箱）包装规格为：4×20ml/盒、4×50ml/盒、4×100ml/盒、4×250ml/盒、4×500ml/盒、4×1L/箱、4×5L/箱
【预期用途】
用于细菌或真菌的涂片染色
【检验原理】
革兰染色法，由丹麦病理学家Christain Gram于1884年创立，是细菌学中很重要的鉴别染色法。通过此法染色，可将细菌鉴别为革兰阳性菌（G+）和革兰阴性菌（G-）两大类。细菌的不同显色反应是由于细胞壁对乙醇的通透性和抗脱色能力的差异，主要是肽聚糖层厚度和结构决定的。经结晶紫染色的细胞用碘液处理后形成不溶性复合物，乙醇能使它溶解，所以染色的前二步结果是一样的，但在G+细胞中，乙醇还能使厚的肽聚糖层脱水，导致孔隙变小，由于结晶紫和碘的复合物分子太大，不能通过细胞壁，保持着紫色。在Gˉ细胞中，乙醇处理不但破坏了胞壁外膜，还可能损伤肽聚糖层和细胞质膜，于是被乙醇溶解的结晶紫和碘的复合物从细胞中渗漏出来，当再用衬托的染色液复染时，显现红色。红色染料虽然也能进入已染成紫色的G+细胞，但被紫色盖没，红色显示不出来。
【储存条件及有效期】
0℃-35℃储存，原包装未开封染色液的有效期为24个月，在有效期内的已开封染色液在开封后6个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
生产日期、有效期详见外盒或瓶上标识。
【样本要求】
涂片时必须注意细心操作，涂片薄而均匀。制备的涂片应自然干燥，采用加热固定时，固定温度不宜过高，以背面接触手背不烫为准，否则可能使细菌形态改变影响观察结果。
【检验方法】
1.涂片：取待检细菌，于载玻片中央涂成薄层或在载玻片上滴如少许无菌水，取菌与水混合均匀，涂成一薄层；
2.干燥、固定：涂片后在室温下自然干燥，也可在酒精灯上略加温，使之迅速干燥，也可以用甲醇或乙醇固定；
3.初染：滴加结品紫染色液染色0.5~1.5分钟，水洗，甩干；
4.媒染：满加碘溶液覆盖载玻片0.5~1.5分钟，水洗，甩干；
5.脱色：滴加脱色液摇动10~30秒，直至流下的脱色液不出现紫色时为止，立即用水冲去脱色液，甩干；
6.复染：滴加沙黄染色液或复红染色液染色20~60s，水洗；
7.滤纸吸干或在空气晾干，镜检。
【检验结果的解释】
革兰氏阳性菌呈蓝色至紫色，革兰氏阴性菌呈红色。
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文献和实验一、目的和要求 1．了解革兰氏染色法原理及其在细菌分类鉴定中的重要性。 2．掌握革兰氏染色的基本步骤。 二、原理 G+、G-细菌的细胞壁成分和结构不同。G+的CW主要有肽聚糖形成的网状结构组成，在染色过程中，当用95%乙醇处理时，由于脱水而引起网状结构中的孔径变小，CW通透性降低，使结晶紫-碘复合物被保留在CW内而不易脱色，因此呈蓝紫色。G-的CW中肽聚糖含量低，脂类物质含量
液界 liquid junction 指二种浓度或不同组成的电解质的接触面。液界可简单地把比重轻的溶液由重叠在重液之上而形成，但随着时间的进行，由于扩散或对流等可多少出现液体的混合。为防止混合可采取放置多孔质的膜以延缓扩散，或不断流动液体更新液界等方法。在液界上可产生液界电位（ liquid junction potential， EL ）。比较简单的是在浓度不同的同一种一价的电解质溶液间或浓度相同并且具有共同的离子的不同的电解质溶液间的情况下，液界电位的大小与液界的混合
Taq Talk 荧光定量 PCR 系列课程之【qPCR 预混液的选择】一起来了解如何高效地选择合适的 qPCR 预混液
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