5-溴-2-羟基-3-甲基苯腈 5-Bromo-2-hyd

重组子的转化和阳性克隆的筛选

β-半乳糖苷酶活性，在含有X-gal培养板上为白色菌落，而载体自身环化后转化的细菌为蓝色菌落。由于这种颜色标志，重组子与非重组子的区别一目了然，可以很容易将之区分。 (二)限制酶图谱筛选(电泳筛选) (三)核酸杂交筛选 (四)免疫化学筛选 四.操作步骤 1.将大肠杆菌DH5α 在LB平板上划线，37 ℃培养16-20hr(或过夜) 2.从平板上挑取一个2-3mm大小的单菌落移至2-5ml LB液体培养基中，37

推荐 分子生物基本技术

5、在连接反应中，如不对载体分子进行去5'磷酸基处理，便用过量的外源DNA片段（2-5倍），这将有助于减少载体的自身环化，增加外源DNA和载体连接的机会。 　　6、麦康凯选择性琼脂组成的平板，在含有适当抗生素时，携有载体DNA的转化子为淡红色菌落，而携有带插入片段的重组质粒转化子为白色菌落。该产品筛选效果同蓝白斑筛选，且价格低廉。但需及时挑取白色菌落，当培养时间延长，白色菌落会逐渐变成微红色，影响挑选。 　　7、X-gal是5-溴-4-氯-3-吲哚-b-D-半乳糖（5-bromo-4-chloro

【分享】分子生物学的一些基本技术

灭菌。溶液终浓度为: K+ 3mol/L, Acˉ 5mol/L。 　　9、RNA酶A母液：将RNA酶A溶于10mmol/L Tris·Cl(pH7.5), 15mmol/L NaCl中,配成10mg/ml的溶液,于100℃加热15分钟,使混有的DNA酶失活。冷却后用1.5ml eppendorf管分装成小份保存于-20℃。 　　10、饱和酚：市售酚中含有醌等氧化物,这些产物可引起磷酸二酯键的断裂及导致RNA和DNA的交联,应在160℃用冷凝管进行重蒸。重蒸酚加入0.1％的8-羟基喹啉(作为抗氧