1,3-二甲基-5-吗啉基-1H-吡唑-4-甲醛 1,3-

一文理清免疫荧光实验流程和常见问题

免疫荧光（immunofluorescence）是一种常用的光学显微术，即用荧光显微镜来观察细胞中的特定生物分子。免疫荧光依赖于抗体抗原的特异性结合，然后通过直接标记或间接标记方法使用荧光分子指征抗体-抗原结合的位置，以确定目标生物分子在细胞中的位置、丰度和分布情况。   免疫荧光实验流程 1. 固定 固定液种类：有机溶剂（甲醇、乙醇、丙酮等）；交联剂（4%PFA、10%中性福尔马林），固定液的选择取决于被研究抗原的性质及所用抗体的特性。但针对磷酸化的抗体，不适合用甲醛，会导致磷酸

RNA-FISH不难，和小助手一起拨开云雾见月明

定性、半定量或相对定位分析的一种实验方法。 二、实验步骤 1、样本准备 （1）载波片处理 1%盐酸酒精充分浸泡盖玻片，加盖，浸泡 1h 以上。流水冲洗盖玻片（控制流速，勿冲出盖玻片)；灭菌双蒸水洗4-5遍，室温，振荡洗涤；无水乙醇泡3次，每次数分钟；倾去乙醇，放入温度为60°C左右烤箱烘干数小时，高压灭菌烤干； （2）收获分化不同时期细胞。 2、固定及透化 （1）1X PBS 洗一次细胞； （2）室温，4%多聚甲醛固定10 min； （3）1X PBS洗细胞，3次，每次

免疫细胞化学常用试剂

ECD和戊二醛加入混合液，振摇后计时，用pH计检测，约2~3min时，pH降至6.6，再以1N的NaOH在4min内调pH至7.0，此时，将该混合固定液加入盛有细胞（经PBS漂洗过）的器皿中，在23℃固定7min后，以PBS洗去固定液，即可进一步处理。ECD即乙基-二甲基氨基丙基碳亚胺盐酸盐[1-ethyl-3（3-dimethyl-aminoprpyl）-carboi-imide hydrochloride]，简称乙基-CDI，常用于多肽类激素的固定，对酶等蛋白质的固定也有良好效果。ECD单独应用