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- 文献和实验
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见包装
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见包装
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88
- 供应商:
广州市左克生物
- 规格:
10mg
链霉亲和素(Streptavidin,SA)是阿维丁链霉菌(Streptomyces avidinii)在生长过程中分泌的一种同型四聚体蛋白。同亲和素一样,一摩尔的链霉亲和素可以结合四摩尔的生物素,与生物素具有很高的亲和力。由于SA不含糖基且等电点接近于中性,因此SA在检测应用中具有比亲和素更低的非特异性结合水平。低非特异性核心链霉亲和素与天然链霉亲和素相比,去除与活性无关的序列,仅保留与活性有关的核心序列,并对序列做了修饰,热稳定性、溶解性、活性等方面相较于天然链霉亲和素,均得到大幅提升。通过对序列中的氨基酸进行突变,降低了偶联过程中的非特异性吸附 (该产品pI:8.93)。
产品特点与技术指标
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产品名称 |
低非特异性核心链霉亲和素(LNS-cSA) |
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目录编号 |
NRPA74 |
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规 格 |
1 mg,10 mg,100 mg,500 mg,1g |
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产品形式 |
冷冻干粉(5mM 磷酸钾盐缓冲液、海藻糖,pH 7.4) |
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分 子 量 |
四聚体53.6kDa,单体14.2kDa |
| 活 性 |
≥17 U/mg蛋白(Green改良法测定) |
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纯 度 |
≥95%(SDS-PAGE检测) |
| 浓度测定 | 紫外吸收法,消光系数E(0.1% at 280 nm) =2.949 |
| 来 源 |
大肠杆菌发酵工程菌株 |
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保存条件 |
-20℃保存 |
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运输条件 |
冰袋或干冰低温运输 |
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有 效 期 |
3年 |
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文献和实验干货 | CUT and Tag 核心酶 Hyperactive PA/PG-Tn5 Transposase 大解密
比高、实验周期短( 1 天实现从细胞到文库构建)、可重复性好等显著优势,尤其适用于早期胚胎发育、干细胞、肿瘤以及表观遗传学等研究领域。 图 1. CUT&Tag 原理图 由于 CUT&Tag 主要是针对极低细胞起始量进行实验,因此对核心酶原料有着极高的要求。CUT&Tag 技术的核心原料酶是 Hyperactive PA/PG-Tn5 Transposase ,它具有高活性,对微量 DNA 有高灵敏度和高亲和力,能有效抓取数十个细胞中的有限结合位点等特点
亲和层析纯化 硫酸铵沉淀法或 DEAE 纯化的血清,含有大量的杂蛋白将竞争性结合胶体金颗粒表面的 结合位点。这些杂蛋白拥有高含量的控制蛋白与胶体金结合的三种氨基酸残基,很容易与裸 露的胶体金颗粒结合。出现这种情况时,检测系统中指示剂的灵敏度水平降低。 同理,如果采用经A蛋白或G蛋白柱层析纯化的抗体,然后IgG片段中可能含有大量的非特异性的IgG,而不是需要的特异性IgG.所有的IgG将与胶体金结合,结果可能是低灵敏度。 从亲和层析柱上洗脱下的高亲和抗体应该是高亲和抗体,从而可以产生高
值比率( 495/280 或 550/280 ),选取适当组分合并。 生物素标记抗体 抗体标记中生物素的引入使整个过程灵敏度大大提高!这种方法可使抗体或其它蛋白质的ε-氨基与酰化的生物素共价结合,生物素化的分子可以通过酶标记的抗生物素蛋白或荧光染料-链霉抗生物素蛋白复合物来检测。小分子水溶性生物素对链霉亲和素的高亲和力是该方法的设计基础。 操作步骤 1.用无水 DMSO 配制 10mg/ml 生物素 N- 羟基琥珀酰亚胺酯溶液。 2.硼酸盐缓冲液(0.1mol/L, pH8.8
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