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- 文献和实验
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见包装
- 保质期:
见包装
- 库存:
88
- 供应商:
广州市左克生物
- 规格:
10mg
链霉亲和素(Streptavidin,SA)是阿维丁链霉菌(Streptomyces avidinii)在生长过程中分泌的一种同型四聚体蛋白。同亲和素一样,一摩尔的链霉亲和素可以结合四摩尔的生物素,与生物素具有很高的亲和力。由于SA不含糖基且等电点接近于中性,因此SA在检测应用中具有比亲和素更低的非特异性结合水平。 该制品已被广泛应用于多种生物技术领域,诸如:包被免疫检测用微孔板,制备SA 偶联酶制剂,SA 偶联荧光素、SA 偶联磁珠等,进而参与酶联免疫吸附和酶催化放大实验,免疫组化化学、生物分子纯化、生物传感器、生物纳米微球、预靶向制药研究和生物芯片被料等。 (该重组链霉亲和素C端含His-Tag标签,pI:6.42)
产品特点与技术指标
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产品名称 |
重组链霉亲和素(Recombinant Streptavidin, r-SA) |
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目录编号 |
NRPA05 / NRPA05 V1 |
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规 格 |
1 mg,10 mg,100 mg,500 mg |
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产品形式 |
NRPA05 :冷冻干粉(5mM PB,pH 6.0);NRPA05 V1:冷冻干粉(5mM 磷酸钾盐缓冲液、海藻糖,pH 8.0) |
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分 子 量 |
四聚体62.4kDa,单体15.6kDa(SDS-PAGE检测单体约为16.5 kDa) |
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活 性 |
≥15U/mg蛋白(Green改良法测定) |
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纯 度 |
≥95%(SDS-PAGE检测) |
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浓度测定 |
紫外吸收法,消光系数E(0.1% at 280 nm) =3.22 |
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来 源 |
大肠杆菌发酵工程菌株 |
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保存条件 |
-20℃保存 |
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运输条件 |
冰袋或干冰低温运输 |
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有 效 期 |
3年 |
注:
1. 链霉亲和素冻干粉易溶于水,溶解性可达10 mg / mL 或更高;
2. 建议使用纯水溶解;
3. 如有未溶解物质,建议延长复溶时间。也可以通过离心或其他方式除去不溶物后,再用于后续实验,不会对总蛋白产生很大的影响。
4. 考虑到蛋白质特殊性,冻干粉建议现用现配,溶解后应避免反复冻融,如需多次使用,建议按需分装后冻存(≤-20℃);避免在4℃下长期存放。
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文献和实验值比率( 495/280 或 550/280 ),选取适当组分合并。 生物素标记抗体 抗体标记中生物素的引入使整个过程灵敏度大大提高!这种方法可使抗体或其它蛋白质的ε-氨基与酰化的生物素共价结合,生物素化的分子可以通过酶标记的抗生物素蛋白或荧光染料-链霉抗生物素蛋白复合物来检测。小分子水溶性生物素对链霉亲和素的高亲和力是该方法的设计基础。 操作步骤 1.用无水 DMSO 配制 10mg/ml 生物素 N- 羟基琥珀酰亚胺酯溶液。 2.硼酸盐缓冲液(0.1mol/L, pH8.8
,例如以E.Coli为工程酶的重组抗原,如其中含有E.Coli成份,很可能与受过E.Coli感染者血清中的抗E.Coli抗体发生反应。抗原中也不能含有与酶标抗人Ig反应的物质,例如来自人血浆或人体组织的抗原,如不将其中的Ig去除,试验中也发生假阳性反应。另外如抗原中含有无关蛋白,也会因竟争吸附而影响包被效果。间接法中另一种干扰因素为正常血清中所含的高浓度的非特异性抗体。病人血清中受检的特异性IgG只占总IgG中的一小部分。IgG的吸附性很强,非特异IgG可直接吸附到固相载体上,有时也可吸附到包被
液 IPES 0.134g、0.5M EDTA(pH8.0)20μl、5M NaCl 0.8ml、甲酰胺8ml,加DEPC H2O至10ml。3. RNase消化液:5M NaCl 120μl、1M Tris-HCl(pH7.4) 20μl、0.5M EDTA(pH8.0)20μl、RNase A(10mg/ml) 8μl、RNase T1(250U/μl) 1μl,加DEPC H2O至2ml二、操作步骤1.反义RNA可由含T7或SP6启动子的重组质粒为模板制备,也可以用含启动子的PCR产物为模板制备
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