4T1/GFP完全培养基

外泌体专用培养基 VS 去外泌体血清，谁赢了？

体，后续培养后收集的细胞上清中的外泌体不确定是从细胞分泌的还是血清中来的，影响结果的准确性。   2. 营养：细胞培养是需要一定的营养的，那么如果不加血清，单独只用基础培养基，就会导致细胞处于饥饿状态，严重影响细胞生长，甚至出现吞噬外泌体的现象，影响实验结果。   3. 杂蛋白：去外泌体胎牛血清可以很好地解决 1、2 中涉及的问题，但还会存在杂蛋白影响蛋白定量结果，导致数据偏高，影响后续实验的准确性。如果使用外泌体专用无血清培养基（专门针对外泌体获取的培养基，化学成分明确，类似于完全培养基的一种

实验 Q&A：如何用慢病毒转染构建稳转细胞系

：4～6 h 换液的时间延长，8～10 h，设置过夜试试。还有一种是 4～6 小时换液的时候用的等量的有血清新鲜培养基稀释原有的无血清的培养基，不撤掉病毒，继续培养 24 小时，用新鲜培养基替换含有病毒的培养基。2. 元元，我着急做实验，我不用 24 孔板，行不行，我用瓶，用平皿行不行？答：如果你病毒量足够的话，完全可以。那怎么换算呢，根据细胞量或者培养基以及底面积自己算个大概的病毒量就行。自己换算吧，元元数学不好。3. 元元，还有个问题是不是扩增倍数越多越好？答：这个不是的，HIV 病毒是逆转

相对定量，你的内参选对了吗？

了解一下。 实验目的：测定肝癌细胞 X 基因相对于正常肝细胞的表达量。通过荧光定量检测可得：肝癌细胞中 X 基因的 CT= 25，正常肝细胞中 X 基因的 CT= 26，所以，利用表达量倍数计算公式 2-△CT计算，发现肝癌细胞中的 X 基因表达量是正常肝细胞表达量的 2 倍。 但是，上面这个定量结果检测有效的前提是：必须保证两盘细胞的细胞数量完全一致；RNA 提取、逆转录以及定量效率及操作必须完全一致；不存在操作误差等。这显然是无法达到的。 那如何才能使这些误差不影响 X 基因