新西兰兔肝癌模型

新西兰兔肝癌建模方法介绍
构建VX2细胞系建立的新西兰兔肝癌模型，是研究肝癌发生发展机制、评估治疗方案的重要手段。该模型通过将VX2肿瘤细胞接种至新西兰兔肝脏，模拟人类肝癌的病理过程，以下从多个环节详细介绍其建模方法。?
一、建模前准备?
（一）实验动物选择?
选取健康、体重在2-2.5kg的新西兰兔，雌雄不限，实验前需在标准实验动物房适应性饲养1周，期间观察其饮食、活动及排便情况，确保无潜在疾病。?
（二）细胞培养与准备?
复苏VX2细胞系，在含10%胎牛血清、1%双抗的RPMI1640培养基中，置于37℃、5%CO?培养箱培养。待细胞融合度达80%-90%时，用胰酶消化，离心收集细胞，用无菌PBS重悬，调整细胞浓度至1×10?个/mL备用。?
（三）实验器材与试剂?
准备无菌手术器械、超声仪、麻醉剂（戊巴比脱钠，30mg/kg）、碘伏、酒精、生理盐水等。?
二、建模操作步骤?
（一）动物麻醉?
采用耳缘静脉注射戊巴比脱钠进行全身麻醉，待兔子角膜反射减弱、四肢肌肉松弛后，将其仰卧固定于手术台上。?
（二）肝脏定位与消毒?
使用超声仪确定肝脏位置，在剑突下至脐部区域备皮，依次用碘伏、酒精消毒，铺无菌手术单。?
（三）细胞接种?
沿腹中线切开皮肤及腹壁，暴露肝脏。选择肝脏左外叶，使用微量注射器将200μL含VX2细胞悬液（细胞数2×10?个）缓慢注入肝实质内，进针深度约5mm，注射后停留1-2分钟，防止细胞液反流。?
（四）术后处理?
缝合腹壁及皮肤，用碘伏消毒伤口，肌肉注射青霉素（40万单位/只）预防感染，将兔子转移至温暖环境直至苏醒。?
三、建模后观察与评估?
（一）日常观察?
术后每日观察兔子精神状态、饮食、体重变化及伤口愈合情况，若出现伤口感染、异常消瘦等情况及时处理。?
（二）模型评估?
术后1-2周，通过超声检查观察肝脏肿瘤生长情况，测量肿瘤大小；术后2-3周，可处死部分实验兔，取肝脏组织进行病理切片，观察肿瘤细胞形态及浸润情况，验证模型是否构建成功。?
四、注意事项?
整个操作过程需严格遵循无菌原则，防止术后感染；细胞接种时要注意进针深度和速度，避免损伤肝脏大血管；实验过程中要密切关注兔子生命体征，如出现麻醉过深等意外情况，及时采取相应急救措施。