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文献和实验【讨论】抗体和那些不能说的"秘密"-抗体选择的PASS标准 (请加精)
(Purification),抗原信息(Antigen),抗体的特异性(Specificity)以及抗体的 种属来源(Species)这四个方面的相关信息。 Purification 抗体的优劣,包括特异性,效价等方面和生产抗体过程中使用的纯化工艺是直 接相关。但科研人员在选择抗体的时候去常常忽略这个方面。 在行业内,使用蛋白A或G纯化单克隆抗体的方法被广泛接受。那么,多克隆抗体纯化工艺 呢? 很多公司都使用亲和纯化(affinity
,对于各种多克隆抗体,蛋白A适用于家兔、人、猪、脉鼠、狗或猫的抗体,而蛋白G适用于小鼠、大鼠、绵羊、马、驴、牛或山羊的多克隆抗体。 一旦抗体与蛋白A或蛋白G微珠结合后,再通过双功能结合剂将其交联。双功能结合剂的种类很多,但通常使用二甲基庚二酸酯(DMP),因其价廉而且易于操作。DMP的两种结合基团相同,都能与游离的氨基结合,由于其碳分子骨架的韧性大,大多数抗体-蛋白A或蛋白G组合在合适的距离内存在反应位点,故能有效地交联。偶然不能有效交联,可以使用带有不同长度碳原子空隙的其他交联剂。 准备工作
、IgG2b和IgG3亚类连接,而将蛋白G用于IsGl。蛋白G用于与大鼠单抗连接,对于各种多克隆抗体,蛋白A适用于家兔、人、猪、脉鼠、狗或猫的样本,而蛋白G适用于小鼠、大鼠、绵羊、马、驴、牛或山羊的多克隆抗体。 一旦抗体与蛋白A或蛋白G微珠结合后,再通过双功能连接剂将其交叉连接到基质上。可以使用任何双功能连接剂,但大多数人使用二甲基庚二酸酯(DMP),因其价廉而且易于掌握。DMP的2种结合基团相同,都能与游离的氨基结合、由于碳分子骨架有很大的韧性,大多数抗体/蛋白A或蛋白G组合在合适
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