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文献和实验DNA发生反应。然后用酶标羊(或兔)抗鼠IgG抗体及相应底物进行显色。使用这一方法,可检测出单个抗原分子。材料与试剂包括: ①所测物的单克隆抗体(鼠);②所测物的多克隆抗体(兔);③生物素化羊抗鼠IgG;④生物素化羊抗兔IgG;⑤生物素化dUTP;⑥Klenow聚合酶;⑦PCR反应液;⑧引物(自行设计);⑨生物素化DNA标记分子。
virus, EDSV)胶体金试纸条。该试纸条能检出浓度约为1.35 μg/mL的纯化鸡减蛋综合征病毒。程安春等[12]应用银加强胶体金探针检测提纯的鸡减蛋综合征病毒(EDSV)抗原的最低检出量为0.117 19 μg/mL,以此法检测了人工感染的50只鸡采集的样本,对卵巢、输卵管峡部、咽喉部、软壳蛋的阳性率均为100%,粪便阳性率为92%。王泽霖等[13]采用胶体金标记纯化的羊抗鼠IgG,建立了一种对鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)进行检测的银加
和Zimmerman(MEIA法,Membrane Enzyme Immunoassay)分别用特制的滤膜来捕获临床标本中的感染细胞及游离HSVAg,快速并提高阳性检出率. (2)特异性抗体.第四军医大学分子病毒室的双抗体夹心法由多克隆抗体改用单克隆抗体后,大大提高了特异性,同时采用多株单克隆抗体混合使用,还使EIA的敏感性提高,结果与国外报道一致. (3)酶选择,目前主要用辣根过氧化物酶(HRP)和硷性磷酸酶(AKP).根据Clayton的试验结果,AKP较HRP敏感. (4)底物选择.除常规
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