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- 文献和实验
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- 保存条件:
2-8°C
- 保质期:
6个月
- 库存:
100
- 供应商:
百欧泰
- 规格:
5ml/10ml
| 规格: | 5ml | 产品价格: | ¥1500.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 10ml | 产品价格: | ¥2500.0 |
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文献和实验组织切片的免疫酶标抗体染色法 1)4%多聚甲醛固定的组织置15%~20%蔗糖PBS中漂洗,4℃过夜或组织块下沉至 杯底; 2)制作30~40um厚的振动切片或冰冻切片,PBS漂洗; 3)2%H2O2甲醇处理,室温20分钟,封闭内源性过氧化物酶活性; 4)1%BSA室温孵育15分钟; 5)第一抗体4℃孵育12~24小时,PBS漂洗; 6)HRP或生物素标记的第二抗体室温孵育30―60分钟,如系生物素标记的第二抗体,反应后则需进一步按ABC法要求操作
Immunofluorescence / Confocal Microscopy Protocol
min 4% paraformaldehyde in 0.1M phosphate buffer pH 7.4, 0.03M sucrose on ice. ** 3. Wash 2x PBS/1%BSA. From now on everything can be at room temp, or on ice. 4. Permeabilize 5 min RT in 0.2% saponin, PBS, 0.03M sucrose, 1% BSA.
,通过预染蛋白marker来确定电泳停止时间。 (4) 湿转法,转膜条件:300mA恒流;0.45um孔径PVDF膜,转膜时间1h。转膜完成后丽春红染色试剂对膜进行染色,观察转膜效果。 (5) 封闭:将膜完全浸没于5%BSA-TBST中,水平摇床孵育2h(RT)。 (6) 一抗孵育:5%BSA-TBST稀释一抗, 4℃水平摇床孵育过夜。 (7) 次日,洗膜:TBST洗3次,每次10min。 (8) 二抗孵育:5%BSA-TBST稀释二抗:山羊抗兔,山羊抗鼠IgG(H+L)HRP
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