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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
39
- 英文名:
cystathionine β-synthase
- CAS号:
9023-99-8
- 保质期:
2年
- 供应商:
魏氏试剂
- 保存条件:
遮光、干燥、密封、阴凉处储存
胱硫醚合成酶—9023-99-8
中文:胱硫醚合成酶
英文:cystathionine β-synthase
CAS:9023-99-8
分子式:EC 4.2.1.22
纯度:≥90%
货期:24h
货号:HH4001-01
规格:5ku
中文同义词:胱硫醚β合成酶(CBS)
英文同义词:cystathionine β-synthase
技术指标
外观:黄色无定型冻干粉末;蛋白纯度:≥90%;比活性≥8 U/mg(酶粉);葡萄糖-6-磷酸脱氢酶≤0.01%;乳酸脱氢酶≤0.01%;
酶学性质
来源:微生物;分类:EC 4.2.1.22;分子量:51 kDa(SDS-PAGE);等电点5.4;Km值:8.0×10-4 M(L-Serine),1.6×10-4 M;(L-Homocysteine);抑制剂:不受NaN3抑制;最适pH:8.0;最适温度:40℃;pH稳定性:6.0-10.0(25℃,16 h);热稳定性45℃以下稳定(pH 8.0,30 min);稳定性:-25~-15℃静置保存12个月保持90%以上活性;稳定剂:Triton X-100
用途:用于酶法检测同型半胱氨酸。
酶活定义
在下述条件下,每分钟合成1μmol胱硫醚所需的酶量。
试剂准备
试剂I:在50 mM pH 8.0 PBS缓冲液中,加入L-丝氨酸至终浓度10 mM,DL-同型半胱氨酸至终浓度2 mM,S-腺苷甲硫氨酸至终浓度0.38 mM,磷酸吡多醛至终浓度0.25 mM,DTT至终浓度1 mM,CBL至终浓度5 U/mL,NADH至终浓度0.2 mM,LDH至终浓度5U/mL。
试剂II:50 mM pH 8.0 PBS缓冲液。
待测样品:用试剂II将酶液稀释至0.8-2.4U/mL。
操作步骤
1.在1 mL比色皿中加入1 mL试剂I,37℃水浴5 min。
2.加入20μL待测样品,混匀。
3.37℃反应,340 nm测定1 min内吸光度变化ΔAs。
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文献和实验赖氨酸tRNA、lysX负责赖氨酸排泄。lys基因的变异使赖氨酸的生物合成不能进行,用最小培养基培养时需额外添加赖氨酸。metB(Methionine)Map position:90 min功能:metB基因表达胱硫醚γ-合成酶,催化反应如下:0-琥珀酰-L-高丝氨酸 + L-半胱氨酸→胱硫醚 + 琥珀酸盐,是甲硫氨酸生物合成的第二步。metB基因的变异使甲硫氨酸的生物合成受阻,用最小培养基培养时需特别添加甲硫氨酸。cysB (Cysteine)Map position: 28 min功能:cysB
置上,包括 lysA (61 min)、lysC (91 min)、lysP (46 min)、lysT (17 min)、lysX (60 min),它们的功能如下: lysA表达二氨基庚二酸脱羧酶、lysC表达天冬氨酸激酶、lysP是调节赖氨酸转运的基因、转录赖氨酸 tRNA、lysX负责赖氨酸排泄。lys基因的变异使赖氨酸的生物合成不能进行,用最小养基培养时需额外添加赖氨酸。 metB(Methionine) 功能:metB基因表达胱硫醚γ-合成酶,催化反应如下:0-琥珀
工程载体,主要原因是 和 。 25. 黏粒(cosmid)是质粒—噬菌体杂合载体,它的复制子来自 、COS位点序列来自 ,最大的克隆片段达到 kb。 26. 野生型的l噬菌体DNA不宜作为基因工程载体,原因是:(1) (2) (3) 。 27.噬菌粒是由质粒和噬菌体DNA共同构成的,其中来自质粒的主要结构是 ,而来自噬菌体的主要结构是 。 28.l噬菌体载体由于受到包装的限制,插入外源DN***段后,总的长度应在噬菌体基 因组的 的范围内。 29. 在分离DNA时要使用金属离子螯合
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