人白血病阿霉素耐药株 K562/ADR

细胞名称	人白血病阿霉素耐药株
英文名称	K562/ADR
规格	T25
货号	CTCC-0514-NY
种属	人源（Homo sapiens）
组织来源	骨髓（Bone marrow）
疾病	白血病（Leukemia）
性别	女（Female）
年龄	53岁（53 years）
培养体系	该细胞系培养所用基本培养基为RPMI1640 Medium,配置完全培养基时需加入10%FBS，1%Anti-Anti，500ng/mlDoxorubicin(ADR) 用于维持抗药性。
细胞形态	淋巴母细胞（Lymphoblast）
生长特性	悬浮生长（Suspension）
生长特性	悬浮生长（Suspension）

拆包 & 存储

1. 请立即检查包装袋是否有破损或漏液

2. 请立即将细胞培养瓶从包装盒中取出，并按照下方操作步骤进 行培养传代

注意：如为冻存管，请收到后立即解冻培养

 

培养瓶中细胞操作步骤

对于悬浮培养的细胞 ，寄送前 ，我们会将培养基充满整个培 养瓶 ，以减少产品运输过程中细胞所受震荡。

1. 收到细胞产品后 ，请注意观察是否有污染 。将培养瓶置于倒置 显微镜下仔细检查是否浑浊、 是否细菌污染。

2. 将培养瓶竖直放置于37℃培养箱中直至温度平衡 ，随后 ，在生 物安全柜中 ，转移培养瓶中的细胞至离心管中 ，离心200×g /5 -  10min ，去除上清后 ，用5mL培养基吹散细胞。

3. 对上述细胞悬液进行细胞计数及活力检测 ，调整细胞密度至 2-3×105 cells/mL，并转移至新的培养瓶中。

4. 将培养瓶竖直放置于含有5% CO2 的37℃恒温培养箱中培养 。如 果细胞达到传代培养的密度 ，则进行传代培养。

 

冻存细胞操作步骤

注意：为保存细胞的高存活率，请收到产品后，立即解冻培养。

1.将冻存管置于37℃ 水浴中来回晃动，迅速解冻。为避免污染， 确保冻存管口置于水面之上。解冻需迅速，大约2分钟。

2. 一旦冻存管中液体融化后，立即取出，采用 70%酒精喷拭冻存 管表面。从此步开始，后续操作须在生物安全柜中完成。

3.将冻存管中的液体转移到含有5mL完全培养基的离心管中， 离 心200×g /5 - 10min ，用真空泵去除含有冻存液的上清。

4. 用完全培养基重新悬浮细胞并转移到新的培养瓶中。为保证 细胞复苏的存活率，请将培养基在37℃水浴预热后使用。

5. 将细胞置于含有5%CO2 的37℃恒温培养箱中培养。

 

悬浮细胞传代培养

悬浮细胞的传代可通过补加或置换新鲜培养基的方式来完成， 具体做法如下：

1. 取出少量细胞悬液进行细胞计数及活力检测，当细胞密度达到

1.5×106 cells/mL 时，进行细胞传代培养。

2. 取足量细胞加入到盛有新鲜培养基的培养瓶中，将细胞密度维 持在5×105cells/mL。

3. 将培养瓶竖直放置于含有5%CO2 的37℃恒温培养箱中培养 。如 果细胞达到传代培养的密度 ，则进行传代培养。

 

培养基换液: 每隔 2 至 3 天。

注意：培养瓶应使用带滤膜瓶盖以保持培养基与空气和CO2

耐药细胞，需先无药培养稳定后保种再进行加药培养，按照3次 梯度加药：最大剂量1/4，最大剂量1/2，最大剂量。

 

细胞冻存液

细胞冻存液，请使用产品： Cryo Frozen Medium (Cat#CTCC-002-002)

离心收集细胞后，加入适量冻存液（每管细胞冻存量达到10的6次 方），将冻存管放入冻存盒置于负80冰箱，24h后将冻存管转入液 氮长期保存。

 

完全培养基配制

该细胞系培养所用基本培养基为 RPMI1640  Medium,配置完全培养基时 需加入 1 0 % FB S ，1 % Anti - Anti ， 500ng/mlDoxorubicin(ADR)  用于维持 抗药性。