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- 文献和实验
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现货
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海经科化学科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
1ml
产品简介
细胞粗提取物中含有许多能够降解提取物中蛋白质的内源性酶,如磷酸酶和蛋白酶。在体外从细胞和组织中提取蛋白质时,蛋白质产生几乎停止,降解增加。提高完整蛋白质产量的最佳方法是加入已知存在的那些酶的抑制剂。
蛋白酶抑制剂(真菌或酵母抽提用, 100X)(Protease Inhibitor Cocktail for fungal and yeast extracts, 100X)用于真菌和酵母提取物以提高蛋白质的稳定性,起到抑制降解非磷酸化或磷酸化蛋白质底物的蛋白酶的作用。本产品包含 4 种组分,对半胱氨酸、丝氨酸、天冬氨酸和金属蛋白酶具有广谱特异的抑制性。已经用真菌和酵母提取物对这种蛋白酶抑制剂 Cocktail 进行了优化和测试。该蛋白酶抑制剂 Cocktail 溶剂为 DMSO,作为即用型溶液提供。
应用:WB,Co-IP,pull-down,IF,IHC,kinase assay 等。
主要成分
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Product Name |
Summary |
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AEBSF.HCl |
丝氨酸蛋白酶抑制剂 |
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o-Phenanthroline |
金属蛋白酶抑制剂 |
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E-64 |
半胱氨酸蛋白酶抑制剂 |
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Pepstatin A |
天冬氨酸蛋白酶抑制剂 |
使用方法
在室温下解冻,然后在实验前以 1:100(v/v)稀释至溶液样品(如酵母提取物)。
保存条件
-20℃保存,一年有效。
注意事项
1、避免反复冻融。
2、本产品仅限专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品;
3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验棕色小玻璃瓶,标准包装10mg,20mg,50mg,100mg,或根据客户要求提供相应包装
此法抽提的酵母蛋白适用于 SDS 凝胶电泳和 Western 印迹分析。 1. 从 OD600 = 2 的细胞培养物中抽提酵母蛋白质。培养物的一种简单制备方法是将细胞接种到 5ml YPD 中,过夜培养后获得指数培养物( OD600 = 0.5 ~ 2.0 )。 2. 在水浴上把 OD600 = 2 的细胞培养物转到含有 2ml 的 50mmol/L Tris-HCl(pH7.5) 、 10mmol/L 叠氮化钠溶液的 13mm 离心管中,用吊篮式
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问:我电转化的酵母抽基因组后做PCR鉴定,本就有颜色筛选的,应该成功率很大的啊,可是我鉴定了无数个克隆,就是拉不出PCR来。难道抽基因组的方法很关键吗?有的文献甚至用菌落做PCR,是不是骗人的啊?我是用蜗牛酶(鼎国)破壁,再冻融几次,然后用SDS做用一会后加入蛋白酶K,数小时后酚氯仿作用,离心取上清后沉淀DNA,溶解后加RNA作用后,再酚氯仿抽提一次。不知是否有问题?谁有好的方法?答:如果做地是短片断PCR(小于1.5kb),用菌落PCR完全可以,而且在筛选时可省去许多时间,用抽基因组做PCR
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