- ￥180
- 经科
- JK-126
- 2025年12月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
现货
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海经科化学科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
1ml
产品简介
Hoechst 33342（bisBenzimide H 33342，HOE 33342）分子式为C27H28N6O·3HCl，分子量为561.93，CAS编号为23491-52-3，
是一种可以穿透细胞膜对细胞核内DNA染色的蓝色荧光染料；该染色液在溶液中荧光较弱，但在AT序列富集区域的DNA小沟处与之结合后荧光增强，因此被用于细胞核染色，或者常规DNA染色。
本产品为溶液形式，Hoechst 33342浓度为1mg/mL，用于染色时，常用工作浓度推荐0.5-10μg/mL。Hoechst 33342最大激发波长为346nm，最大发射波长为460nm；在与双链DNA结合后，最大激发波长为350nm，最大发射波长为461nm；可用于固定或非固定的细胞或组织的细胞核标记，并可通过荧光显微镜或流式细胞仪等仪器检测。
操作步骤
1. 将Hoechst 33342染色液（1mg/mL）用PBS或其他合适的缓冲液稀释成0.5-10μg/mL Hoechst 33342染色工作液；
2. 对于固定的细胞或者组织切片：
a. 对于固定的细胞或组织样品，固定后去除固定液，使用PBS或者其他合适的缓冲液洗涤2-3次，每次3-5min（如检测悬浮细胞，请按悬浮细胞常规操作方式进行，实验均需添加离心等步骤）；
b. （可选步骤）如需对固定的细胞或者组织进行免疫荧光染色等处理，则优先进行相关处理，处理后再进行Hoechst 33342染色；
c. 取适量的Hoechst 33342染色工作液对固定的细胞或者组织进行染色，覆盖样品并室温孵育5min左右；
d. 去除Hoechst 33342染色工作液后，用PBS或者其他合适的缓冲液洗涤2-3次，每次3-5min；
e. 封片后或者直接置于荧光显微镜下观察，激发波长为350nm，发射波长为460nm。
3. 对于活细胞或者培养组织：
a. 细胞培养物中加入适量Hoechst 33342染色工作液，充分覆盖待染色的样品；通常六孔板一个孔中需加入1mL染色液，96孔板一个孔中需加入100μL染色液；于37℃培养箱中，孵育10-20min；
b. 去除Hoechst 33342染色工作液后，用PBS或者其他合适的缓冲液洗涤2-3次，每次3-5min；
c. 直接于荧光显微镜下观察，激发波长为350nm，发射波长为460nm。
储存与运输
冰袋（wet ice）运输；
-20℃避光保存，12个月有效。
注意事项
1. Hoechst 33342染色工作液孵育的浓度和时间，可根据实际情况进行调整。
2. 荧光染料存在淬灭的问题，染色后尽量当日完成检测，可用抗荧光淬灭封片剂减缓荧光猝灭。
3. 操作时请穿实验服，配戴一次性手套。
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文献和实验可用于固定或非固定的细胞或组织的细胞核标记，并可通过荧光显微镜或流式细胞仪等仪器检测。
Isolation of Resident Cardiac Progenitor Cells by Hoechst 33342 Staining
of stem cells to efficiently efflux vital dyes such as Hoechst 33342. During fluoresence activated cell sorting (FACS) such Hoechst-extruding cells appear to the side of Hoechst-dye retaining cells and have thus been termed side population (SP) cells
Hoechst33258（或Hoechst33342）染色法检测细胞凋亡
Hoechst33258 （或Hoechst33342）染色法检测细胞凋亡 【材料与试剂】 Hoechst33258染液：称取Hoechst33258（或Hoechst33342）1mg，用20ml蒸馏水溶解，过滤，4℃避光保存。用时用蒸馏水10倍稀释成染色液，pH7.0。 固定液：4%多聚甲醛。 荧光显微镜。 【操作方法】 将制备好的石蜡切片按常规脱蜡、水化，用PBS洗5min； 或冰冻切片用冰丙酮固定15min，吹干，用PBS洗5min； 或细胞
1．悬浮生长的细胞在培养状态下加入Heochst 33342，终浓度为1μg/ml；帖壁生长的细胞用含有0.02％EDTA的0.25％胰蛋白酶消化成单细胞悬液，离心，弃上清，用1ml全培养液重悬细胞，加入Heochst 33342，终浓度为1μg/ml，37℃孵育7～10min。 2．4℃ 500～1000r/min离心弃去染液。 3．加入1.0ml PI染液，4℃避光染色15min。 4．400目的筛网过滤1次。 5．流式细胞仪分析。
技术资料