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- 详细信息
- 文献和实验
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- 库存:
现货
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海经科化学科技有限公司
- 保存条件:
4℃
- 规格:
50ml*2
产品简介
本产品ECL化学发光试剂盒是一种高灵敏度的化学发光试剂盒,基本原理是以luminol为基础的ECL化学发光。本产品能与二抗上偶联的辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)发生化学反应,产生荧光,通过用X光片压片或其它适当荧光成像设备(CCD相机等)检测样品。
本公司目前生产的ECL化学发光试剂盒有两种,分别是JK-240 ECL化学发光试剂盒和JK-241 超敏ECL化学发光试剂盒。对于丰度较高的目的蛋白检测,例如内参蛋白等,推荐使用JK-240,可检测含量大于等于2ng的目的蛋白。而对于低丰度较难检测的目的蛋白,推荐使用JK-241,该产品灵敏度较JK-240提高至少5倍,可检测到pg级含量的蛋白。
注意:
1、JK-240 ECL化学发光试剂盒可满足绝大部分目的蛋白的曝光实验需求。
2、在使用JK-240 ECL或其他ECL曝光时间过长或者效果不佳时,可选用JK-241超敏ECL化学发光试剂盒。
3、高丰度目的蛋白检测,若使用JK-241超敏ECL可能会出现荧光淬灭呈现出空心带或无带,建议使用JK-240 ECL化学发光试剂盒或者稀释一抗二抗。
4、实验中常备多种灵敏度的ECL试剂盒可使得曝光显影更为效率,获得更好的结果图片。
操作步骤
1. 配制ECL工作液:将ECL A液和ECL B液等体积混合,注意4℃避光保存。现配现用,2天内使用。
2. Western实验中PVDF膜经二抗孵育后,多次洗涤,滤纸吸去多余液体。在曝光匣上贴两层PE手套或者其他透明薄膜,将PVDF膜的蛋白面朝上放在曝光匣两层薄膜之间,加入混合好的ECL工作溶液覆盖在膜上放置1-2 min。
3. 用滤纸或吸水纸吸去ECL工作液,盖上层薄膜开始压胶片。
4. 压完的胶片用显影、定影试剂进行显影和定影。根据发光强度调整曝光条件。
储存与运输
冰袋运输;4℃避光保存,有效期12个月。如果长期不用,可以-20℃保存更长时间。
注意事项
1. ECL A液和B液在吸取过程中必须要更换吸头,A液和B液相互污染后会导致A液或B液逐渐失效,另外金属离子的污染会降低本试剂的灵敏度,请注意用干净吸头。使用后密封保存。
2. 如果曝光后背景很深,可能原因有二抗浓度过高,或一抗浓度过高,或者封闭液不合适,换用其他封闭液。
3. 如果荧光迅速淬灭,出现空心条带等情况,可能原因是目的条带荧光过强,导致HRP迅速消耗ECL。
4. 如果没有发光信号,可能是目的蛋白表达很弱,可延长压片时间。
5. 操作时请穿实验服,佩戴一次性手套
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