- ￥2360
- DOJINDO（东仁）
- D048-1ml
- 2026年03月19日
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- 详细信息
- 文献和实验
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- 库存：
50
- 供应商：
广州市左克生物
- 规格：
1ml
产品简介:
品牌：DOJINDO/东仁
货号：D048-1ml
产品名称：超氧阴离子和羟自由基检测（ESR）——DMPO
特点：
• 纯度高
• 杂质峰少
规格性状
质量约为1.1g
产品概述
由于具有潜在的致癌风险和促进衰老的作用，生物体内的自由基已成为研究的热点。 DMPO是研究自由基最常用的自旋捕获剂。 它适用于捕获氧自由基，尤其是超氧化物，并生成具有特征的EPR信号的加合物。 但是，大多数市售的DMPO包含会引起高背景的杂质。 因此，这些DMPO需要进一步纯化才能在EPR上进行实验。 Dojindo的DMPO实行严格的质量管控，没有杂质引起的背景问题，因此不需要任何预纯化处理。
产品特点
•超高纯度
•更高的信噪比
•无需预纯化
同仁化学研究所 (Dojindo) 的DMPO没有杂质 (*) 检出
以羟自由基的Fenton反应(黑色)和空白(蓝色)为例，同仁化学研究所(Dojindo)的峰更清晰，S/N比例更高
应用
自旋捕获剂，EPR（ESR）检测，超氧阴离子，羟基自由基
原理
自旋捕捉ESR技术是一种检测活性氧的最可靠的办法，它能提供具有特征的ESR信号。DMPO采用一种特殊的敏感方法，可以捕捉超氧阴离子和羟自由基等，分别产生独特的ESR光谱。因此它是探测生物系统内ROS的强有力工具。
操作步骤
SOD清除超氧阴离子的活性检测
1. 将15 μl的DMPO溶液和 50 μl的5 mM的次黄嘌呤加入到35 μl的0.1 M的磷酸盐缓冲液 (pH 7.8) 中。
2. 加入50 μl的待测SOD标准品或待测样品，涡旋振荡 1-2 s。
3. 加入50 μl的0.4 U/ml的黄嘌呤氧化酶之后立即涡旋振荡。
4. 放置一段时间 (例如 1 min) 将溶液转入ESR样品管中检测。
5. 通过峰值计算相对强度(DMPO-O2-/Mn2+)。
C-,N-,S-基自由基的检测
1. 制备100 mM含有25 μM Diethylenetriaminepentaacetic Acid (DTPA)的磷酸盐缓冲液 (pH 7.4)，作为过渡金属螯合剂。
2. 制备以下过氧化物酶底物：A) 100 mM 甲酸钠(HCOONa)；B) 100 mM氰 化 jia(KCN)；C) 100 mM叠 氮 钠(NaN3)；D) 含有100 mM亚硫酸钠 (Na2SO3)的100 mM磷酸盐缓冲液 (pH 7.4)。
3. 制备4.0 mg/ml(~100 μM)的辣根过氧化物酶 (HRP)溶液和1 mM H2O2溶液。
4. 制备浓度为1 M的DMPO溶液。
5. 在离心管中加入130 μl的缓冲液，加入20 μl已配好的1 M的DMPO溶液，再加入20 μl底物储存液，10 μl的1 mM H2O2溶液，最后加入20 μl HRP触发反应。
6. 涡旋振荡离心管，加入到进样系统中，检测图谱。
7. 加样后调节光谱并得到图谱。各物质的终浓度为：100 mM DMPO，10 mM的底物，50 μM H2O2，10 μM HRP。
数据和操作流程由Bruker公司友情提供
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文献和实验自旋共振（ESR）光谱法 在室温下，溶液中O2-的ESR信号不能直接被检测出，但能够通过自旋捕捉法间接获得。最常见的诱捕剂是5,5-dimethyl-1-pyrroline N-oxide(DMPO)。由于O2- 诱捕DMPO会产生一个特殊的光谱图，因此ESR法是O2-检测的方法中特异性最好的一种。然而，DMPO与O2-间的二阶速度常数比O2-自发反应常数相对要低，因此需要向溶液中加入大量的DMPO（如：终浓度为0.45M）。这样，每次试验所要用的DMPO将花去大笔的经费。 这种方法的另一
的过氧化氢生成量[15]（15） ； ；自由基的检测方法很多，目前主要有ESR，HPLC，化学发光法以及分光光度法，我看了一点文献，我困惑的是，我要测定细胞中的超氧阴离子和羟自由基，我想用荧光分光光度法或者化学发光法，可是我发现一些反应体系要在酸性条件下反应（比如有的里面就有硫酸）。这对于细胞应该有损伤啊~还有怎样处理细胞~希望对于自由基检测有经验的战友多多指导，也希望希望做自由基检测的新手一起交流.有国外文献提到，DCFH容易自氧化，不稳定，还有正象你文献所说一样，DCFH所反映的是线
是5,5-dimethyl-1-pyrroline N-oxide(DMPO)。由于O2- 诱捕DMPO会产生一个特殊的光谱图，因此ESR法是O2-检测的方法中特异性最好的一种。然而，DMPO与O2-间的二阶速度常数比O2-自发反应常数相对要低，因此需要向溶液中加入大量的DMPO（如：终浓度为0.45M）。这样，每次试验所要用的DMPO将花去大笔的经费。 这种方法的另一个问题是在实验中需要一套较为昂贵的ESR设备。 4．利用水溶性四唑盐检测SOD的新方法 为了克服上述的诸多问题，我们在做SOD检测时需要考虑
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