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- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司
- 规格:
500mL/瓶
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文献和实验5min,弃上清,去除DMSO残留。 5.【重悬】加入1-2mL完全培养基轻轻吹打重悬;准备T25培养瓶,标注名称、代次、日期,加入4-6mL完全培养基,再加入细胞悬液,十字混匀。 6.【培养】放入37℃、5%CO2培养箱静置培养;次日换液去除死细胞碎片。 二、细胞传代 1.【实验准备】配制完全培养基:DMEM高糖(abs9483-500ml/SV30303.01)+10%FBS(abs972-500mL/SV30302.03)+1%P/S(abs9244-100ml/SV30010)。提前取出PBS
吹打重悬。 6.【传代】按1:2-1:6接种至新瓶,补加完全培养基,十字混匀,标注信息。 7.【镜检】镜下确认分散,放入37℃、5%CO2培养箱,约2-3天观察(每周传代2次)。 注意:BRL 3A贴壁较牢,消化需镜下确认脱壁(3-5min),切勿未脱壁即强行吹打;传代频率约2-3天/次,密度过低恢复慢。 三、细胞冻存 1.【准备工作】冻存液:无血清细胞冻存液(abs9417-100mL)或90% FBS(货号:abs972-500mL/SV30302.03)+10% DMSO(abs9187-100
保存。 (3).丙酮酸钠:配制浓度50 mM,4 ml/支,终浓度为1 mM/ml,-24 ℃保存。 (4).Hepes液:配制浓度1 M(5ml/支),一支Hepes加入到200 ml完全培养基中,终浓度为25 mM/ml,常温保存。 83、支原体污染及检测 (1).支原体污染在细胞培养中最常见、不易被查觉,但支原体污染可显著影响细胞功能干扰实验结果。支原体是介于细菌和病毒之间的目前所知能独立生活的最小微生
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