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广州市左克生物
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4×50ml
货号:BB-44715-4×50ml
产品名称:Gomori六胺银法尿酸盐染色试剂盒
品牌介绍
贝博生物 BestBio 致力于为中国广大客户提供量身定制的科研用试剂产品和专业技术服务,帮助科研人员加速生物领域的研究进展。并为实现这一理念提供优质的产品和服务。"
" 贝博生物致力于细胞分析、蛋白质生物学、外泌体研究、细胞组织染色等检测试剂盒的研发及相关衍生产品的开发,与国内外经验丰富的实验室开展合作,组成了技术力量强大的研发团队,制定了科学、严谨、高效的研发管理体系和标准化服务流程。
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文献和实验的是Lorch的Gomori法。本实验使用的是同时采用偶氮染色法和偶联反应法的TRAP/ALP染色试剂盒(和光纯药,产品编号294-67001)。关于切片的厚度,Lorch建议为8μm,同时也研究过普通的4μm切片是否能染色、双重染色的顺序应该先染TRAP和ALP中的哪一个、封片剂是否必须选水溶性封片剂等问题。染色法的结果是偶氮染色法中,切片过厚就会有酶扩散现象,即骨基质的TRAP染色倾向染成红色。即使是4μm的切片,只要增强了反应条件(反应温度及反应时间),也能充分染色。也就是说,TRAP染色反应
碱性磷酸酶(ALP)是成熟成骨细胞的标志性酶,同时成骨细胞形成的钙结节也是成骨细胞的标记物。 以ALP为目标物的检测方法: 1 Gomori钙钴法 【染色原理】 ALP在pH值9.4的环境下,以镁离子作为激活剂,能够把β-甘油磷酸钠水解出磷酸,磷酸与高浓度的钙盐结合形成无色的磷酸钙,再与硝酸钴作用形成磷酸钴,经硫化胺处理形成黑色的硫化钴沉淀在酶活性处。 【孵育液配制】 3%β-甘油磷酸钠5ml 2%巴比妥钠5ml 蒸馏水10ml 2%
分别为0.3%双氧水和0.3%Triton X-100混合而成。配制方法是先用微波加热的36 ml PBS,再接着加120 ul Triton X-100,并加热一会儿,冷却至临用前加0.4 ml 30%H2O2。4、5%羊血清或封闭血清,用PBS稀释。5、含0.03%H2O2的0.05%DAB(避光):用20×DAB(1%,10 mg/ml)5 ul+0.1 ul 30% H2O2+95 ul PBS。6、一抗用PBS稀释(也可用抗体稀释液),二抗用中杉金桥的SP染色试剂盒。7、Xylene、梯度
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