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- 文献和实验
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100+
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上海维亦特生物
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48T/96T
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文献和实验一、实验目的 了解和掌握荧光分光光度计的使用方法 二、实验原理 测Vc 的实验原理:抗坏血酸在氧化剂存在下,被氧化成脱氢抗坏血酸,氧化型的抗坏血酸与邻苯二胺作用生成荧光化合物(脱氢抗坏血酸对-氮杂萘),此荧光化合物的激发波长是350nm,荧光波长在430nm,其荧光强度与抗坏血酸含量成正比,样品的荧光强度与抗坏血酸标准样品荧光强度相比较,即可计算出样品中抗坏血酸的含量。 测VB2的实验原理 :维生素B 2 (核黄素)在468nm紫外光激发下产生
。 发射光谱 发射光谱:固定激发光波长(选最大激发波长), 化合物发射的荧光强度与发射光波长关系曲线。 固定发射光波长进行激发光波长扫描,找出最大激发光波长,然后固定激发光波长进行荧光发射波长扫描,找出最大荧光发射波长。激发光波长和发射荧光波长的选择是本实验的关键。 多维葡萄糖粉中维生素B2含量的测定 维生素B2(又叫核黄素,VB2)是橘黄色无臭的针状结晶,其结构式为: 维生素B2易溶于水而不溶于乙醚等有机溶剂,在中性
VB15mg,然后收集4小时以内尿液,测定其中VB1含量:<100μg为营养缺乏,100~200μg为不足,>200μg为正常,>400μg为充裕。 2.空腹一次尿液中VB1和肌酐含量测定 二者比值<27为不足,27~65为低下,66~129为适宜,≥130为过高。 3.红细胞转羟乙醛酶活力测定 这是测定VB1营养状况的特异指标,若TPP(硫胺素焦磷酸酯)效应>16%即表示VB1缺乏。 五、维生素B2(VB2) VB2(核黄
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