土壤谷氨酰胺合成酶(GS)ELISA科研试剂盒

ELISA protocol

ELISA protocol： 1.取5－10ul BMMY表达上清用0.05M NaHCO3稀释到100ul铺ELISA板，37度或室温振荡大于1小时。注意一定要做一个GS115空菌株表达上清作为阴性对照，最好还找一个带有histag的蛋白作为阳性对照。 2.TPBS洗板3次，方法：倒掉铺板液，倒置于毛巾上轻轻拍打几次，加TPBS至满，重复。 3.加封闭液（TPBS加1％脱脂奶粉）350ml/孔，室温下放置40分钟－1小时，TPBS洗3次。 4.加封闭液稀释

真相揭秘 | 为什么构建稳定表达细胞株这样难？

1000kb不等。即使是同一种细胞，选择过程不同，基因扩增的范围也不同。   然而，出现了更有效的扩增系统—GS扩增系统——GS（谷氨酰胺合成酶）扩增系统是新近发展的更有效的系统，具有更高的扩增效率。   这是为什么？ 谷氨酰胺合成酶在ATP水解提供能量时，利用细胞内的氨和谷氨酸合成谷氨酰胺，在缺乏细胞外谷氨酰胺的培养条件下，加入谷氨酰胺合成酶抑制剂甲硫氨酸亚砜（MSX）,可使GS 基因及与之相连的目的基因扩增，达到提高目的基因表达水平的目的，由于只有多拷贝的GS 编码基因才能抗MSX

基因工程抗体的表达

表达，如扩增标志基因谷氨酰胺合成酶GS，可被MSX(L-methionine sulphosimine)所抑制，GS显性选择标志可在多种类型细胞中表达，通过大剂量一次性筛选，可获得高拷贝扩增。扩增标志基因可分别位于重、轻链载体上，通过共转染来获得抗体，也可将重、轻链串联于一个表达载体上，此时基因顺序很重要，因为下游启动子可被上游启动子通读而产生闭合现象。       2．大肠杆菌中表达  大肠杆菌虽没有糖基化修饰的功能，但是，现在已经证实表达的抗体片段如Fab、ScFv、VH能正确折叠及装配成具有