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上海维亦特生物
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48T/96T
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文献和实验碱性磷酸单酯酶的提取和离子交换层析 [原理] 碱性磷酸单酯酶(Alkaline phophatase,简称AKP)为金属酶,在磷酸盐代谢中起重要作用。它能水解磷酸单酯键,但不水解磷酸二酯键,作用于多种底物的酯解,如单核苷酸、葡萄糖-1-磷酸、β-甘油磷酸等。核酸序列分析、DNA重组技术、酶标免疫检测技术都要利用此酶。 AKP是一种多聚体金属酶,酶分子中含有
碱性磷酸单酯酶的提取和离子交换层析 [原理] 碱性磷酸单酯酶(Alkaline phophatase,简称AKP)为金属酶,在磷酸盐代谢中起重要作用。它能水解磷酸单酯键,但不水解磷酸二酯键,作用于多种底物的酯解,如单核苷酸、葡萄糖-1-磷酸、β-甘油磷酸等。核酸序列分析、DNA重组技术、酶标免疫检测技术都要利用此酶。 AKP是一种多聚体金属酶,酶分子中含有
主要方法。林一贝(Lineweaver—Burk)氏根据米—曼氏方程式又推导如下方程式: 以不同的底物浓度1/[S]为横坐标1/v为纵坐标,按直线回归方程计算,作图,并向纵轴方向延长,此线在横轴上截距为1/Km的负值。 本实验以碱性磷酸酶为例,选择不同浓度的磷酸苯二钠为其底物,磷酸苯二钠被AKP水解后,生成酚和磷酸,酚在碱性溶液中与4—氨基安替比林作用,经铁氰化钾氧化生成红色醌的衍生物,根据红色的深浅可测出酶活力高低,其反应式如下
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