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500ml
Dulbecco的改良Eagle培养基—DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium)是一种广泛使用的基础培养基,适用于多种哺乳动物细胞培养,包括原代成纤维细胞,神经元,神经胶质细胞,HUVEC和平滑肌细胞,以及HeLa,293,Cos-7和PC-12等细胞系。DMEM是在MEM培养基的基础上研制的,与MEM培养基相比,氨基酸的含量增加了2倍,维生素增加了4倍,同时还增加了非必须氨基酸、微量铁离子以及丙-酮-酸-钠。
DMEM培养基最初设计为葡萄糖含量1000mg/L的低糖型,后来又发展出葡萄糖含量为4500mg/L的高糖型,现已广泛应用于各种细胞的培养。DMEM高糖型普遍应用于生长快、粘附性低的细胞、杂交瘤的骨髓瘤细胞、克隆细胞、DNA转染的转化细胞、原代病毒宿主细胞、单一细胞的培养以及疫苗的生产,例如利用CHO细胞表达EPO和生产乙肝疫苗。
保存条件
2-8℃避光保存,有效期一年。常温运输。
产品仅供于科研研究用途(非临床科研研究)
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文献和实验家兔椎间盘(intervertebral disc )细胞的体外培养方法
Material and method:Material :1、培养皿、培养瓶、烧瓶、试管等。2、分离组织需要的眼科剪子、眼科镊子。3、5%CO2孵箱、PH计、95%氧气源。4、36电动恒温水浴。5、培养液、各种缓冲液及添加剂DMEM高糖培养基、Hank’s缓冲液 、20%胎牛血清,转换生长因子(TGF-β1)(5ng/mL)、胰岛素-转铁蛋白-硒(10ug/mL胰岛素,5ug/mL转铁蛋白,和0.5ng/mL亚硒酸盐)青霉素100U/Ml,链霉素100U/ml 。6、消化液 胶原
材料和方法 1、仪器: 手术器械一套,倒置显微镜(Leica),CO2细胞孵育箱(Heraeus),超净工作台(苏州净化设备有限公司),扫描电子显微镜(Hitachi)。 2、主要试剂: DMEM高糖培养基(Gibco),胎牛血清(Hyclone,杭州四季青生物工程材料公司),胰蛋白酶、EDTA(Ameresco);小鼠
选用DMEM高糖培养基。 1.取5-7天大鼠心脏,用PBS洗净血液 2.用75%乙醇浸泡30s 3.用PBS冲洗后,剪碎,用适量0.5%胶原酶在37度摇摆水浴中消化30min,加入适量0.02%胰蛋白酶,用吸管轻轻吹打,37度水浴中消化30min。 4.分离下的细胞过200目筛网,过滤液用20%小牛血清DMEM培养基混悬离心(1000转/min,5min),未过网的弃之。 5.所得细胞悬于20%小牛血清DMEM培养基,并调整细胞浓度到104-105/ml,接种于0.2
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