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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
现货
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海经科化学科技有限公司
- 保存条件:
4℃
- 规格:
1ml
产品介绍
本公司生产的难转细胞专用转染试剂是一款适用于难转细胞的DNA专用转染试剂,可用于质粒DNA的高效传送。它具有极强的DNA转染能力,与其它转染试剂相比,具有转染效率高、不受血清影响、毒性低、稳定性好、转染简单易行、重复性好等优点。
应用范围
该转染试剂可适用于众多难转染细胞株的质粒DNA转染。适用于多种贴壁细胞系,特别适用于各种难转细胞如 BMDC、4T1、CT26、DC2.4等难转染细胞,均可得到较高的转染效率,且重复性好。
使用方法
质粒DNA的转染
以24孔板为例,请参考下表的转染规模调整,步骤如下:
1、细胞接种: 每孔接种0.5-1.0×105个细胞,细胞培养12-24小时,使转染时细胞密度达到60-70%融合度
2、质粒DNA稀释: 将0.5µg质粒DNA加入Opti-MEM培养基中,稀释后的终体积为10µL
3、转染试剂稀释: 取1μL的转染试剂加入到9μL的Opti-MEM培养基中,稀释后的终体积为10µL
4、复合物制备:将上述质粒DNA稀释液和转染试剂稀释液混合,轻轻吹打均匀后,室温静置10分钟
5、将上述20µL复合物加入到24孔板中,轻轻吹打混匀,继续培养18-48小时后检测转染效率,无需更换培养基
质粒DNA的转染优化
可通过改变细胞密度、DNA浓度以及转染试剂浓度对转染进行优化。保证细胞融合度在60%以上,转染试剂 (µL):DNA (µg)可以在1:1和5:1之间调整。
不同培养板所需转染试剂和DNA的用量
|
培养板 |
单孔面积 |
接种培养基 |
Opti-MEM稀释后终体积 |
DNA转染 |
|
|
试剂用量 |
DNA |
||||
|
96孔板 |
0.3cm2 |
200µL |
10µL |
0.4µL |
0.2µg |
|
24孔板 |
2cm2 |
500µL |
20µL |
1µL |
0.5µg |
|
12孔板 |
4cm2 |
1mL |
40µL |
2µL |
1µg |
|
6孔板 |
10cm2 |
2mL |
100µL |
4µL |
2µg |
|
60mm培养皿 |
20cm2 |
5mL |
200µL |
8µL |
4µg |
|
100mm培养皿 |
60cm2 |
15mL |
600µL |
24µL |
12µg |
运输保存
常温运输,2-8℃可保存一年。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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