IP Elution Buffer

一篇搞定 IP、co-IP 实验

液，三个一起上 从以上三个结果可以看到，第一种孵育方法抗原得率最高，第三种抗原得率最低。如果靶蛋白丰度较高，第一种和第二种差别并不显著。注意，整个体系选择同样的孵育顺序，以确保结果的重复性。 5、各种 buffer 整个 co-IP 系统，涉及到裂解液，结合液，洗涤液，洗脱液，这4种溶液要如何考量呢？ 裂解液---样本质量很大程度受限于裂解液，要考虑其中的去垢剂种类。 非变性裂解液，含有非离子型去垢剂，有助于稳定天然蛋白构象，比如 IP lysis buffer。不建议使用变性裂解

【求助】co-IP

了，要分开难度还是很大，这时候就要很慎重，实验过程要十分肯定检测有这么一条目的条带才行。最好还是能找到不同来源的抗体啦~~ hiqihong 不同种源的抗体WB验证有时在IgG位置也出现条带 最好的办法是用洗脱buffer洗脱 如果是用tag做的IP 则用tag肽洗脱，IgG是能洗掉的 devil19840 紫叶竹韵 wrote: 做IP，之后Western 分析，看到有两条带

Chromatin IP (CHIP assay)

elution buffer combine supernatants, incubate at 65 °6 h to ON take 1/100 of the protein amount taken for the IP, add to 150 µl elution buffer (INPUT control) incubate at 65 °C 6 h to ON add 750 µl PB buffer (Qiagen