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北京百泰派克生物科技有限公司
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植物蛋白质组学和代谢组学的结合方式
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植物dànbáizhì组学和代谢组学的整合策略与技术路径
现代植物系统生物学研究中,植物dànbáizhì组学和代谢组学的结合方式已成为解析生命过程分子机制的核心范式。这种多维组学整合通过同时捕获基因表达终产物(dànbáizhì)及其生化反应下游小分子(代谢物),构建了从基因型到表型的完整调控网络。在技术层面,植物dànbáizhì组学和代谢组学的结合方式主要依赖质谱平台的协同应用:高分辨率液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)可实现dànbáizhì的定性与定量分析,而气相色谱-质谱(GC-MS)或核磁共振(NMR)则擅长代谢物的广谱检测。二者的数据整合需通过生物信息学管道完成,包括非靶向代谢组学的特征峰匹配与dànbáizhì相互作用网络的共表达分析。例如,在植物胁迫响应研究中,植物dànbáizhì组学和代谢组学的结合方式能同时鉴定到上调的抗氧化酶(如SOD、CAT)及其对应的代谢物(抗坏血酸、gǔguānggāntài),从而揭示氧化还原稳态的跨层次调控逻辑。实验成本方面,具体费用需要根据实验需求和样品情况来确定,但关键投入集中于样本前处理的标准化和质谱仪器的机时配置。
植物dànbáizhì组学和代谢组学的结合方式在实验设计上需解决动态范围差异的挑战。dànbáizhì组覆盖度受限于提取效率(尤其是膜蛋白和低丰度蛋白),而代谢组则面临离子抑制效应和异构体区分问题。通过引入同位素标记技术(如TMT/TMTpro标记dànbáizhì组,CE-MS同位素内标代谢组),可提升定量准确性。近期发展的数据非依赖采集模式(DIA)在植物dànbáizhì组学和代谢组学的结合方式中展现出优势,例如SWATH-MS可同步获取碎片离子谱图,与代谢组的MS/MS全扫描数据兼容性更强。在番茄果实发育研究中,这种策略成功关联了糖代谢酶家族(如转化酶、蔗糖合酶)与果糖/葡萄糖的动态积累模式。
生物信息学整合是植物dànbáizhì组学和代谢组学的结合方式的关键环节。多组学数据需通过多元统计(如OPLS-DA)或机器学习(随机森林、SVM)进行降维和特征筛选。KEGG和PlantCyc数据库的联合注释能识别通路级关联,如将苯丙烷代谢途径中的PAL酶活性与木质素单体含量变化映射到同一生化模块。值得注意的是,植物次级代谢产物的结构多样性要求代谢组学注释工具(如GNPS、MetDNA)具备更高的灵敏度,而植物特异性dànbáizhì数据库(如UniProtKB的Viridiplantae子集)可减少dànbáizhì鉴定的假阳性。
常见问题:
Q1. 如何解决植物样本中多糖和多酚类物质对dànbáizhì组学和代谢组学分析的干扰?
A:采用bǐngtóng/TCA沉淀联合PVPP(聚乙烯聚bǐgēwán酮)处理可有效去除多酚;对于多糖干扰,建议使用苯酚法提取dànbáizhì并结合HILIC色谱柱分离极性代谢物。
Q2. 在时间序列实验中,植物dànbáizhì组学和代谢组学的结合方式如何确定zuì优采样时间点?
A:建议先进行转录组预实验确定关键基因表达拐点,再基于dànbáizhì半衰期(通常2-48小时)和代谢物周转速率(分钟级至小时级)设计梯度采样,重点关注表型显著变化前12-24小时的窗口期。
Q3. 跨物种比较研究中,植物dànbáizhì组学和代谢组学的结合方式如何实现数据标准化?
A:引入无biāojìdìng量(LFQ)的通用内参蛋白(如核糖体蛋白),代谢组则使用跨物种保守代谢物(如有机酸、氨基酸)进行峰面积归一化,必要时采用Z-score转换消除物种间基线差异。
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文献和实验东大学齐鲁医院刘德山教授为共同通讯作者。研究采用流式细胞技术、蛋白质组学,粪便代谢物学、植物代谢组学和微生物组学等研究方法,研究人参固本(RSGB)口服液对甲状腺毒症加速衰老小鼠模型的影响。 本研究采用常规检测方法结合多组学技术,研究人参固本(RSGB)口服液对甲亢加速衰老小鼠模型的影响。对于血液和血清,文章采用了流式细胞确定免疫衰老表型,采用生化检验和蛋白组学确定脂质的代谢变化。采用植物代谢组学解析特有代谢产物。文章还利用关联分析技术,挖掘和归纳作用机制。文章为中药的现代化研究提供路线,为中药的临床
近年来科学家们对代谢组学的关注度越来越高,有大量的代谢组学 SCI 得以发表,它成为继基因组学、转录组学和蛋白质组学之后的又一个热点研究领域。 2019~2022 年代谢组学 SCI 发表数量 在 PubMed 中检索“Metabolomics OR Metabolome”,2019~2022 年 8 月为止,共发表相关论文 36,135 篇。以今年当前发文量(7324 篇)来看,已逼近 2019 的全年发文量,可见它在当下科研界的火热程度。 看到代谢组学研究越来越受到重视,可是真正
breast epithelial MCF-10A cells. 科学问题:双酚 S (BPS) 与双酚 A (BPA) 具有相似的雌激素效应。考虑到 BPS 的内分泌干扰效应,本研究采用基于质谱的代谢组学和定量蛋白质组学方法,研究了 BPS 对正常人乳腺上皮细胞株 MCF-10A 的影响。 研究内容 表型实验:暴露于 BPS 达 24 小时后,MCF-10A 细胞的增殖以一种刺激的方式发生改变,在剂量为 1μM 时增殖率最高。 蛋白质组分析:总共有 200 种蛋白质被鉴定为在暴露于 BPS
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