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牛乳中半乳糖(D-Galactose)含量试剂盒(紫外法),

微板法
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  • ¥930
  • wksubio
  • WS10150W
  • 国内
  • 2025年10月21日
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    • 英文名

      D-Galactose Content Test Kit in Milk (UV Method)

    • CAS号

      WS10150W

    • 保质期

      六个月

    • 供应商

      上海瓦兰生物

    • 保存条件

      2-6℃

    • 规格

      48T

    本试剂盒仅供科研使用
    BCA 法蛋白含量测定试剂盒说明书
    (货号:WS8140F 分光法 96 )
    一、产品简介:
    BCA 蛋白含量试剂盒提供一种简单,快速,耐去污剂(最多 5%)的检测蛋白质浓度
    的方法。由于蛋白质能将 Cu2+还原成 Cu+BCA 可与 Cu+结合生成紫蓝色复合物,在 562nm
    处有最大光吸光值,颜色的深浅与蛋白含量成正比,因此可根据吸光值测定蛋白质浓度。
    二、试剂盒组分与配制:
    试剂名称
    规格
    保存要求
    备注
    试剂 A
    液体 50mL×2
    4℃保存
    依据实验用量,临用前试剂
    A:B=50:1 的比例混匀成反应 mix
    试剂 B
    液体 2mL×1
    4℃保存
    标准品
    液体 1.5mL×1
    4℃保存
    若重新做标曲,则用到该试剂
    三、所需的仪器和用品:
    可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、台式离心机、恒温水浴锅、移液器。
    四、蛋白含量测定:
    建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
    样本和试剂浪费!
    1、样本制备:
    ① 组织样本:
    称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液(提取液可选用酶提取缓冲液、蒸馏水、生理盐水)
    冰浴匀浆,12000rpm4℃离心 10min,取上清,即待测液。
    【注】:依据研究经验,一般需将样本粗提液稀释到适当倍数再进行测定,如 10 倍。实验前可以先选 2
    个样本测定,摸索确定适合本次实验的稀释倍数。
    ② 细菌或细胞样本:
    先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液;
    超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次),
    12000rpm4℃离心 10min,取上清,即待测液。
    【注】:依据研究经验,一般需将样本粗提液稀释到适当倍数再进行测定,如 10 倍。实验前可以先选 2
    个样本测定,摸索确定适合本次实验的稀释倍数。
    ③ 液体样本:澄清无色液体样品可以直接测定。若浑浊,离心后取上清检测。
    2、上机检测:
    ① 可见分光光度计预热 30min,调节波长到 562 nm,蒸馏水调零。
    反应 mix 置于 60℃水浴预热 30 min(仅煮一次即可)
    试剂名称(μL
    测定管
    空白管(只做一次)
    样本
    20
    蒸馏水
    20
    反应 mix
    800
    800
    混匀,于 60℃保温 30min,全部转移到 1mL 玻璃比色皿
    中,于 562nm 处测定吸光值 A,△A= A 测定-A 空白。
    【注】:若△A1.5,需将样本用提取液稀释后再测定。本试剂盒仅供科研使用
    2
    五、结果计算:
    1、标准曲线方程:y = 0.0687x - 0.0006x 是标准品质量:μgy 是△A
    2Cpr (mg/g 鲜重)=[(A+0.0006)÷0.0687×10-3]÷(V1÷V×W) ×D
    =0.728×(A+0.0006) ÷W×D
    3Cpr (mg/mL)=[(A+0.0006)÷0.0687×10-3]÷V1×D=0.728×(A+0.0006)×D
    4Cpr (μg/104 cell))=[(A+0.0006)÷0.0687]÷(V1÷V×500)×D=1.46×(A+0.0006)×D
    V---提取液体积:1mL
    V1---加入粗提液体积:0.02mL
    W---样本质量:g
    D---稀释倍数,未稀释即为 1
    500---细菌或细胞总数,万。
    附:标准曲线制作过程:
    1 标准品母液(500μg/mL)。
    2 把母液稀释成以下浓度梯度的标准品:0, 2.5,5, 25, 50, 250, 500. μg/mL。也可根据实
    际样本来调整标准品浓度。
    3 依据测定管加样表操作,根据结果即可制作标准曲线。

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