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- wksubio
- WS8020F
- 国内
- 2025年10月13日
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- 详细信息
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Glutathione S-transferase (GST) Kit
- CAS号：
WS8020F
- 保质期：
3个月
- 供应商：
上海瓦兰生物
- 保存条件：
4℃
- 规格：
48T
本试剂盒仅供科研使用
谷胱甘肽 S-转移酶（glutathione S-transferase，GST）试剂盒说明书
（货号：WS8020F 紫外法 48 样）
一、产品简介：
谷胱甘肽转移酶（GST; EC 2.5.1.18）是一种具有多种生理功能的蛋白质家族，清除潜
在毒性化合物，包括由氧化应激产生的物质，是细胞防御机制的一部分。
GST 催化 GSH 与 CDNB 结合，其结合产物的光吸收峰波长为 340nm；通过测定 340nm
波长处吸光度上升速率，即可计算出 GST 活性。
二、试剂盒组成和配制：
试剂名称
规格
保存要求
备注
提取液
液体 100mL×1 瓶
4℃保存
试剂一
粉体×3 瓶
-20℃保存
每瓶临用前甩几下使粉体
落入底部，外加 8.5mL 提
取液溶解，可分装保存至
-20℃，一个月内用完。
试剂二
液体 2.5mL×1 瓶
4℃保存
【注】：反应 mix 的制备（现配现用）：按照试剂一：试剂二：提取液=10:1:9 的比例混匀。
三、所需仪器和用品：
紫外分光光度计、1mL 石英比色皿(光径 1cm) 、低温离心机、水浴锅、可调式移液器、
蒸馏水。
四、谷胱甘肽 S-转移酶（GST）活性检测：
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费！
1、样本制备：
① 组织样本：
称取约 0.1g 组织(水分充足的果实样本可以取 0.2g)，加入 1mL 提取液，进行冰浴匀浆。
12000rpm，4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
【注】：若增加样本量，可按照组织质量（
g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例进行提取
② 细菌/细胞样本：
先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取 500 万细菌或细胞加入 1mL 试剂一；
冰浴超声波破碎细菌或细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；12000rpm，
4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。（或按照细菌或细胞数量（104 个）：试剂一体积
（mL）为 500~1000：1 的比例进行提取）
【注】：不能用细胞裂解液处理细胞。
③ 液体样本：直接检测。若浑浊，离心后取上清检测。
2、上机检测：
① 紫外分光光度计预热 30 min，温度设定 37℃，调节波长到 340 nm，蒸馏水调零。
② 可先做 2 个样本预测定，熟悉操作过程，并依据测出的吸光值 A 是否符合预判做相
应调整。
③ 在 1 mL 比色杯孔板中依次按照下表加入试剂：
试剂名称（
μL）
测定管
样本
50
反应 mix
950
混匀，37℃下，立即于 340nm 下读取 A1 值，10min 后
读取 A2 值。ΔA=A2-A1。本试剂盒仅供科研使用
2
【注】：1. 若ΔA 过小，可以延长反应时间（如：15min 或更长），或增加样本加样体系 V1（如增至 100μL，
则反应 mix 相应减少），则改变后的反应时间 T 和加样体积 V1 需代入计算公式重新计算。
2. 若 A2 大于 1.5，可以缩短反应时间（如 2min），或减少样本加样体系 V1（如减至 25μL，则
反应 mix 相应增加），则改变后的反应时间 T 和加样体积 V1 需代入计算公式重新计算。
五、结果计算：
1、按蛋白浓度计算：
活性单位定义：在上述反应条件下，每毫克蛋白每分钟催化 1nmol 的 CDNB 与 GSH 结
合为 1 个酶活单位。
GST(nmol/min/mg prot)=[ΔA÷ε÷d×V2×109]÷(Cpr×V1)÷T =208.4×ΔA÷Cpr
2、按样本质量计算：
活性单位定义：在上述反应条件下，每克样品每分钟催化 1nmol/L CDNB 与 GSH 结合为
1 个酶活单位。
GST(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA÷ε÷d×V2×109]÷(W×V1÷V)÷T=208.4×ΔA ÷W
3、按细胞数量计算：
活性单位定义：在上述反应条件下，每 104个细胞每分钟催化 1nmol/L CDNB 与 GSH 结
合为 1 个酶活单位。
GST(nmol/min/104 cell)=[ΔA÷ε÷d×V2×109]÷(细胞数量×V1÷V)÷T=208.4×ΔA÷细胞数量
4、按液体体积计算：
活性单位定义：在上述反应条件下，每毫升液体每分钟催化 1nmol/L CDNB 与 GSH 结合
为 1 个酶活单位。
GST(nmol/min/mL)=[ΔA÷ε÷d×V2×109]÷V1÷T =208.4×ΔA
ε---产物摩尔消光系数，9.6×103 L/mol /cm；
d---比色皿光径，1cm；
V---加入提取液体积，1mL；
V1---样本加样体积，50μL=0.05 mL；
V2---反应体系总体积，1000μL=1×10-3 L；
T---反应时间，10min；
W---样本质量，g；
Cpr---上清液蛋白质浓度（mg/mL），建议使用本公司的 BCA 蛋白含量检测试剂盒。
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谷胱甘肽S-转移酶(GST)试剂盒
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