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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 供应商:
SHCC
- 运输方式:
干冰/常温
- 年限:
10年
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
1*10^6cell/T25
|
种属 |
人 |
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别称 |
TF1; MFD-1 |
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组织来源 |
骨髓 |
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疾病 |
红细胞白血病 |
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传代比例/细胞消化 |
1:2传代,维持细胞浓度在3*10^4-5*10^5cells/ml |
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完全培养基配置 |
RPMI1640培养基;10%胎牛血清;2ng/ml rhGM-CSF;1%双抗 |
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形态 |
淋巴母细胞样 |
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生长特征 |
悬浮生长 |
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倍增时间 |
~36-72h |
|
STR |
Amelogenin:X,Y;CSF1PO:12,13;D13S317:8,9;D16S539:9,12;D18S51:13;D19S433:14,16;D21S11:30;D2S1338:19;D3S1358:15;D5S818:13;D7S820:12;D8S1179:11,15;FGA:18,19;TH01:7,9;TPOX:8;vWA:15,17; |
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培养条件 |
气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。 |
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冻存条件 |
冻存液:90%FBS,DMSO 10%, 或使用非程序冻存液:官网货号SH-H040 |
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保藏机构 |
ATCC; CRL-2003 |
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备注 |
该细胞为悬浮细胞 ,请注意离心收集细胞悬液 ,请勿直接倒掉细胞培养液。 |
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产品使用 |
仅限于科学研究,不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。 |
1)复苏细胞:将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
- 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
- 加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02%EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3 min(视细胞情况而定),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。
- 将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。
a、收集细胞,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。












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