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- 赛泓瑞生物
- 进口
- SHC1002H
- 2025年07月20日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 供应商：
SHCC
- 运输方式：
干冰/常温
- 年限：
10年
- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 规格：
1*10^6cell/T25
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种属 |
人 |
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别称 |
EJ1 |
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组织来源 |
膀胱 |
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疾病 |
膀胱癌 |
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传代比例/细胞消化 |
1:2传代，消化1-2分钟 |
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完全培养基配置 |
MEM培养基；10%胎牛血清；1%双抗 |
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形态 |
上皮细胞样 |
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生长特征 |
贴壁生长 |
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倍增时间 |
~20-48h |
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STR |
Amelogenin X CSF1PO 10,12 D5S818 10,12 D7S820 10,11 D8S1179 14 D13S317 12 D16S539 9 D18S51 16,18 D21S11 29 FGA 17,22 TH01 6 TPOX 8,11 vWA 17 |
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培养条件 |
气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。 |
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冻存条件 |
冻存液：90%FBS，DMSO 10%, 或使用非程序冻存液：官网货号SH-H040 |
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产品使用 |
仅限于科学研究，不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。 |
1）复苏细胞：将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6 cm皿中，加入约4 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
- 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
- 加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02%EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3 min（视细胞情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。
- 将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。
a、收集细胞，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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文献和实验据统计约 30% 细胞系被交叉污染或错误辨识，因使用了交叉污染或错误辨识的细胞而导致研究结论错误、结果不可重复、临床细胞治疗灾难性后果……，这浪费大量时间、精力和金钱。Everything was going along fine until they discovered their HeLa cell line expressed Y chromosome markers因此近年 NIH、ATCC、Nature 和 Science 等对此多次发出呼吁，要求研究者对细胞进行鉴定。STR 基因
性，因此较适合于作为遗传学DNA分子标记，目前STR分析已广泛应用于遗传制图、性状连锁性分析、亲子鉴定、疾病基因定位和物种多态性研究等诸多领域。 1985年，Mullis发明了聚合酶链式反应（polymerase chain reaction, PCR）, 使DNA的体外复制变成了现实。1988年，Saiki 等将耐热DNA聚合酶引入PCR，提高了扩增反应的特异性和效率，简化了操作程序，并实现了DNA扩增的自动化，迅速的推动了PCR技术的应用和普及。PCR能够在体外快速、特异
分离培养出可稳定扩增传代的膀胱癌细胞，该成果发表在 Protein&Cell 上，题为 Continuous culture of urine-derived bladder cancer cells for precision medicine。 该癌细胞的成功分离为膀胱癌早诊早治及晚期患者药敏筛选平台建立提供了基础 [2]。 图片来源：Protein & Cell尿液中脱落细胞的染色鉴定和分离培养虽然具有高特异性但缺乏敏感性，2020 年 10 月 9 日上海长海医院泌尿科徐传亮团队
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