Phosphine,tris[3-(1,1-dimethyl

稳定表达具有生物活性的人重组对氧磷酶

of paraoxonase-1 activity in lysate The bioactivity of paraoxonase-1 present in the cell lysate was demonstrated by its ability to hydrolyse 4 mM phenyl acetate in 20 mM Tris HCl buffer pH 8.0, containing 1 mM CaCl2. As a control 10 mM EDTA was added

His Tag的功与过

。 His Tag这两个优点使它一直占据Tag家族老大的位置，可谓家喻户晓。但是千万别被这些光环恍了您的眼睛。它并不是完美无瑕的： 一，最常见的就是加了His Tag后，不挂柱。通常解释为Tag 无游离性，折叠到蛋白内部了。解决办法就是在蛋白N/C两端分别加上Tag，或者使用其他Tag，另外就是将蛋白变性后上柱。 二，对于一些容易被氧化的蛋白，个人建议最好别用His Tag。这些蛋白在纯化过程中，要加入还原剂防止蛋白被氧化，IMAC是比较忌讳这些还原剂的，当然你可以选用tris

2D Gel Electrophoresis

for this purpose. ::Chaotrophe: urea and thiourea::Reductant: DTT, Tris(2-carboxyethyl) phosphine (TCEP), tributyl phosphine (TBP)::Detergent: CHAPS, triton x-100::Ampholytes::Protease inhibitors Some researchers also add tris buffer.Chaotrophe.Urea