m蛋白测定和分析的方法

M蛋白测定和分析的方法

M蛋白（Monoclonal protein）是由单克隆浆细胞或B细胞异常增殖产生的免疫球蛋白或其片段，常见于多发性骨髓瘤、华氏巨球蛋白血症等浆细胞疾病。准确测定和分析M蛋白对于疾病诊断、疗效监测及预后评估至关重要。目前，M蛋白测定和分析的方法主要包括血清蛋白电泳（SPE）、免疫固定电泳（IFE）、血清游离轻链（sFLC）测定、质谱技术以及高效液相色谱（HPLC）等。

血清蛋白电泳（SPE）是M蛋白筛查的经典方法，通过电场作用将血清蛋白按电荷和分子量分离为白蛋白、α1、α2、β和γ球蛋白区带。M蛋白通常在γ区或β-γ区间形成单克隆条带，但其灵敏度有限，尤其在低浓度M蛋白或IgA/IgM型M蛋白中可能漏检。免疫固定电泳（IFE）是SPE的补充技术，通过特异性抗体固定M蛋白，显著提高检测特异性和灵敏度，可明确M蛋白的免疫球蛋白类型（IgG、IgA、IgM等）及轻链（κ或λ）。

血清游离轻链（sFLC）测定通过免疫比浊法或酶联免疫吸附试验（ELISA）定量检测血清中未与重链结合的κ和λ轻链，计算κ/λ比值。sFLC对轻链型多发性骨髓瘤和非分泌型骨髓瘤的诊断尤为重要，其灵敏度高于传统电泳技术。近年来，质谱技术（如基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱，MALDI-TOF MS）在M蛋白分析中崭露头角，可jīngquè鉴定M蛋白的分子特征，甚至区分微小残留病灶。高效液相色谱（HPLC）则通过分离血清蛋白组分，定量M蛋白峰值面积，适用于疗效监测。具体费用需要根据实验需求和样品情况来确定。

常见问题：

Q1. 免疫固定电泳（IFE）与血清蛋白电泳（SPE）在M蛋白检测中的主要区别是什么？

A：SPE是一种筛查技术，通过电泳分离蛋白组分并初步识别M蛋白条带，但无法确定其免疫球蛋白类型。IFE则在SPE基础上，使用特异性抗体固定M蛋白，明确其重链（IgG、IgA、IgM等）和轻链（κ或λ）类型，具有更高的特异性和诊断价值。

Q2. 为什么血清游离轻链（sFLC）测定对轻链型多发性骨髓瘤的诊断至关重要？

A：轻链型多发性骨髓瘤患者仅分泌游离轻链（如Bence-Jones蛋白），传统电泳技术可能无法检测到完整的免疫球蛋白。sFLC测定可直接定量血清中游离κ和λ轻链，并通过κ/λ比值异常（正常范围0.26-1.65）辅助诊断，其灵敏度显著优于SPE和IFE。