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上海维亦特生物
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48T/96T
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文献和实验氏染色后镜检,观察菌体形态。 5菌种鉴定 (1)双歧杆菌特定酶的检测 利用果糖-6-磷酸盐对分离得到的菌种进行果糖-6-磷酸盐磷酸酮酶(F6PPK)的测定,初步确定菌种是否为双歧杆菌属。F6PPK测定的操作如下: ①将从样品中分离出的双歧杆菌培养于厌氧液体改良MRS培养基中37℃生长24 h。 ②将菌液4400 rpm离心10 min,收集菌体,缓冲液ⅰ洗涤2次,最后溶于约4 mL缓冲液ⅰ中,制成细菌悬液。 缓冲液ⅰ:现用现配。取0.05 M Na2HPO4 31.5 mL和0.05 M NaH2
Bioresource Technology | 利用宏基因组,中山大学首次阐释微生物除磷的转化机制
)。扩增子测序发现 DS-EBPR 系统中硫 / 硫化物氧化微生物占 7.1%,而硫酸盐 / 亚硫酸盐还原微生物的相对丰度为 22.8%。在磷转化中,多磷酸激酶(ppk1)和外多磷酸酶(ppx)分别参与 Poly-P 的聚集和降解,系统发育分析发现在 DS-EBPR 系统中 ppk1 基因遍布于五个门中(Proteobacteria,Firmicutes,Chlorobi,Chloroflexi 和 Bacteroidetes)。此外,发现一些与硫转化相关的细菌富含 ppk1 基因,如 SOB
比值、酶结合率以及标记率。 3.2 包被用缓冲液及最适包被抗原浓度的优化 3.2.1 包被缓冲液的优化 包被抗原时,为了得到最佳的包被效果,我们采用了碳酸盐缓冲液(50mM ph9.6 )、磷酸盐缓冲液(50mM ph7.6)、以及TRIS盐酸缓冲液(50 mM ph7.6)三种缓冲液作为包被液,抗原包被浓度为5ug/ml,及2.5ug/ml,酶标抗体工作浓度为1:400及1:300,用自动酶标仪分析,选择最佳的包被缓冲液系统(表5)。同时为了保证缓冲液能够长期保存,我们在包被液中添加
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