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北京百泰派克生物科技有限公司
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蛋白质相互作用网络的基本概念
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dànbáizhì相互作用网络的基本概念
dànbáizhì相互作用网络是系统生物学研究的重要范式,它通过图论模型将细胞内dànbáizhì间的物理接触和功能关联转化为可计算的拓扑结构。这种网络由节点(代表单个dànbáizhì)和边(代表相互作用关系)构成,其拓扑特性反映了生物系统的组织原则和功能模块。在真核细胞中,平均每个dànbáizhì与3-10个其他dànbáizhì存在相互作用,形成高度连接的复杂系统。dànbáizhì相互作用网络的典型特征包括无标度性(少数hub蛋白拥有大量连接)和小世界属性(任意两个蛋白间存在较短路径),这些特性使细胞既能保持功能稳定性又具备信号快速传递能力。
构建dànbáizhì相互作用网络的核心数据来源于酵母双杂交(Y2H)、亲和纯化质谱(AP-MS)和dànbáizhì片段互补等实验技术。近年发展的交联质谱(XL-MS)技术能捕获瞬态相互作用,空间分辨率可达Ångström级别。值得注意的是,具体费用需要根据实验需求和样品情况来确定。计算预测方法如结构建模、共进化分析和机器学xídàdà扩展了网络覆盖范围,AlphaFold-Multimer预测的相互作用准确率已达实验验证水平的80%以上。网络分析揭示的模块通常对应特定功能单元,如26S蛋白酶体或转录起始复合物,而网络扰动与癌症等疾病密切相关。
dànbáizhì相互作用网络的动态调控体现在时空特异性上。磷酸化等翻译后修饰可改变约38%的人类dànbáizhì相互作用,这种"开关效应"在信号转导中尤为突出。单细胞测序数据显示,不同细胞类型的核心网络虽保守,但外周相互作用存在显著差异。近期开发的活细胞成像技术如BiFC(双分子荧光互补)实现了相互作用实时观测,时间分辨率达秒级。网络重构需考虑假阳性(约15-20%的Y2H数据)和假阴性问题,整合多组学数据可提高可靠性。
常见问题:
Q1. 如何区分dànbáizhì相互作用网络中的yǒngjiǔ性复合体与瞬时相互作用?
A:yǒngjiǔ性复合体(如核糖体)通常具有稳定的化学计量比和进化保守的界面残基,可通过Native-PAGE或尺寸排阻色谱验证;瞬时相互作用则表现为较低的亲和力(Kd>10^-6M),需要表面等离子共振(SPR)或荧光共振能量转移(FRET)等技术检测动态结合。
Q2. dànbáizhì相互作用网络分析中,为何需要区分物理相互作用与功能关联?
A:物理相互作用指直接分子接触,可通过X射线晶体学确定界面结构;功能关联包括遗传互作、代谢通路耦合等间接关系。两者在网络中形成不同层次的连接模式,错误混用会导致模块识别偏差,如将调控通路误判为复合物组装。
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文献和实验一、引言 在许多的细胞生命活动中,例如 DNA 复制、mRNA 转录与修饰以及病毒的感染等都涉及到 DNA 与蛋白质之间的相互作用的问题。 重组 DNA 技术的发展,人们已分离到了许多重要的基因。现在的关键问题是需要揭示环境因子及发育信号究竟是如何控制基因的转录活性。为此需要: 1. 鉴定分析参与基因表达调控的 DNA 元件。 2. 分离并鉴定这些顺式元件特异性结合的蛋白质因子。 这些问题的研究都涉及到 DNA 与蛋白质之间的相互作用。 研究 DNA-蛋白质相互作用的实验方法主要包括
interaction networks. (一个相互作用网络的可视化系统) 这个软件是加拿大多伦多大学一个生物信息学研究组开发的,其中的Chris Stark, Mike Tyers 都是在蛋白质组研究中的大牛人,这个Osprey的软件平台目的在于更好的研究蛋白质相互作用网络(protein-protein interaction networks)和蛋白质复合物。我们知道在研究一个基因及其表达产物-蛋白质的功能时,绝对不可以孤立的、静止地研究其本身,一定要同时研究和它有相互作用的一些蛋白质/核酸,这就是蛋白质
蛋白质-蛋白质相互作用图谱能对细胞功能和蛋白组机制提供有用信息。除了在线预测蛋白相互作用外,通过比较具有相对专一性语义关系的的两基因语义注释(Gene Ontology terms, GO)的相似性,可以得到重建酵母蛋白互作网络图谱的新方法。为了验证这种方法的有效性,利用高置信蛋白互作标准数据校正确认。由此种方法预测重建的蛋白互作网络含40753种互作关系,2259种蛋白质参与,并形成了16个互相链接的主节点。除了同型二聚体(homodimers),所有的MIPS复合体均被成功整合到预测
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