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常用动物 大鼠,小鼠,性成熟,8-10周龄
适应性饲养后,用消毒棉拭子旋转插入小鼠阴道内,并在阴道内轻轻转动几下后取出,涂于载玻片上,用95%酒精固定30min后晾干。涂片进行HE染色或瑞士染色,观察动情周期。连续观察2周,每日定时进行阴道涂片检查,观察动情周期。选择连续有2个或2个以上正常动情周期(阴道涂片为大量无核角化细胞的大鼠),造模前一天每鼠肌注雌二醇0.1mg/(kg.d,大鼠),使动物统一处于动情期。
捐赠鼠和接受鼠比例为1:2。
建模方法I
大鼠:腹腔注射麻醉后,将大鼠固定于手术板上,腹部剪毛,消毒,并在无菌条件下开腹。在尿道口上约1cm处做垂直正中纵切口长约2-3cm进腹。大鼠子宫呈Y型,分离左侧子宫,近端离左子宫角1cm处结扎,远端离卵巢2cm处结扎,并结扎两端间的子宫系膜血管,切除长约1.5-2.0cm的子宫段,立即放入盛有生理盐水的培养皿中,修剪去子宫浆膜外的脂肪组织,纵向切开子宫腔,剥去浆膜层及肌层,将子宫内膜片剪成5mm×5mm大小,移植到腹壁血管丰富处,注意其内膜面与皮下组织贴合。逐层缝合伤口,待老鼠自然苏醒后常规饲养。术后每天注射庆大霉素,共3天。
建模4周后,开腹检查所有造模大鼠移植的子宫内膜是否生长。若见移植物体积增大,形成表面被覆结缔组织并有血管形成、内有液体积聚的透明小囊泡,则证明造模成功。
建模方法II
小鼠:动情期C57BL/6小鼠,脱颈椎法处死,仰卧位固定于手术台,腹部酒精消毒后,铺上无菌治疗洞巾,戴无菌手套,在耻骨联合上方0.5cm处,沿正中线剖开腹腔。找到Y形子宫,小心分别牵出左、右侧子宫,细心分离双侧子宫系膜。离断宫角与卵巢,在Y形子宫分叉分别剪断左侧及右侧子宫,放入装有10mL37℃生理盐水的无菌弯盘中,反复漂洗子宫表面的血迹,进一步分离剩余粘附的子宫系膜。将两个子宫角分别放置于两个无菌弯盘中,将它们直接剪成大小约1mm3的大小均等的碎片,并将它们悬浮于37℃生理盐水中。将捐赠鼠的子宫按1:2的比例接种于受鼠腹腔,用0.3mL生理盐水悬浮弯盘里的组织碎片。
随机取动情期C57BL/6小鼠,取脐下0.5cm偏正中线0.5cm处的左下腹为进针点,将溶有子宫组织碎片的0.3mL生理盐水用20号针头连同子宫组织快碎片注入接受鼠的腹腔,后放置于鼠笼。直至第9天。随机取动物,处死后,取异位内膜,进行冰冻切片制备,HE染色观察异位内膜病灶是否有典型的内膜腺体及间质,提示复制动物模型是否成功。
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文献和实验大鼠麻醉后,背部脱毛,于 T9-T11 胸椎区域消毒,划约 2-3cm 纵行切口,咬除椎板,暴露硬脊膜,将大鼠固定于多功能鼠固定台,应用脊髓打击器撞击骨髓(打击高度 12mm,重量 10g)大鼠出现尾部痉挛性摆动,表明造模成功。造模后,对各组大鼠进行脊髓损伤的行为学评分,利用斜板实验评测动物脊髓损伤后神经功能恢复情况,分析在脊髓损伤不同时期的变化规律。
的毒副作用,如别嘌呤醇会导致体内脂质过氧化损伤,对肾脏、肝脏及皮肤黏膜都有较大的损害。因此,对高尿酸血症治疗新靶点和新药物的研究获得了广泛的关注,而建立稳定持续的高尿酸血症模型则是研究的重要前提。 图 1. 尿酸代谢途径[1] 尿酸是大多数动物体内嘌呤代谢的终产物,由黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XOD)将次黄嘌呤(hypoxanthine,HX)、黄嘌呤(xanthine)等尿酸前体物质氧化而成。人体内 80% 的尿酸是由体内氨基酸等其他小分子化合物合成尿酸或分解代谢而来;20
兔颈总动脉球囊损伤术后狭窄模型,可模拟经皮腔内冠状动脉血管成形术(PTCA)术后再狭窄的发生发展。高脂饲料加球囊损伤术:目前广泛应用于腹、髂主动脉粥样硬化及颈动脉狭窄模型的建立, 球囊损伤程度的大小成为影响造模成功的关键之一。 切开颈部,分离组织颈动脉血管,颈动脉插入球囊,球囊内注入空气,球囊扩张来回抽动3次,动物模型的成熟完善建立为展开动脉粥硬化、干细胞研究、转基因技术、内皮功能等多方面的研究提供了一个切实可行的方法。最后缝合皮肤,压力泵压力能够维持,表示造模成功,术后可以通过HE验证检测。
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