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上海维亦特生物
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48T/96T
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文献和实验荧光蛋白检测GFP产生绿色荧光蛋白,在395nm和490nm的波长下发出独特的绿色荧光。传统的筛选方法是利用抗生素和除草剂类选择剂,但这些物质对人类和环境的影响还不完全了解,因此,非抗生素筛选系统应运而生。甘露糖阳性选择系统属于非抗生素筛选系统之一,其原理是:甘露糖不能维持各种外植体的生长。当培养植物细胞添加甘露糖时,它只被转化为6-磷酸甘露糖,不能进一步参与代谢,而积累至毒性水平。科学家克隆编码6-磷酸甘露糖异构酶的基因作选择基因,构建表达载体遗传转化植物,用甘露糖作选择剂,选择基因编码的6-磷酸甘露糖异构
基因(nptⅡ)、氯霉素乙酰转移酶基因(cat) nptⅡ、cat及庆大霉素转移酶基因,均为抗生素筛选基因,相关的酶可以对底物进行修饰(磷酸化、乙酰化等),从而使这些抗生素失去对植物生长的抑制作用,使得含有这些抗性基因的转化体能在含这些抗生素的筛选培养基上正常生长,也可以用转化体提取液体,外用同位素标记,放射自显影筛选转化体。氯霉素乙酰转移酶基因测时可通过放射自显影观察。 荧光素酶基因(luciferase Gene) 1985年从北美荧火虫和叩头虫cDNA文库 中克隆出来的,该酶
基因工程研究领域,已使用的报告基因主要有以下几种: 胭脂碱合成酶基因(nos)、章鱼碱合成酶基因(ocs) nos、ocs这两个基因是致瘤土壤农杆菌(Agrobacterium tumfaciens)的Ti质粒特有的,对Ti质粒进行改造,用相应的致瘤农杆菌转化植物体时,如果外源基因转入植物体中,则这两种报告基因在植物根茎叶中均能表达,不受发育调控,检测时直接用转化体提取液进行纸电泳,染色后在紫外光下观察荧光即可。 新霉素磷酸转移酶基因(nptⅡ)、氯霉素乙酰转移酶基因(cat) nptⅡ、cat
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