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昆虫细胞

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  • SHBio
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  • SHC3821
  • 2025年07月16日
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    • 供应商

      SHCC

    • 运输方式

      干冰/常温

    • 年限

      10年

    • 生长状态

      贴壁/悬浮

    • 规格

      1*10^6cell/T25

    产品名称:SDM
    商品货号:SHC-2248
    中文名称: 昆虫细胞
    形态特征: 淋巴母细胞样
    生长特性: 半贴壁生长
    特征特性: 该细胞由武汉大学生命科学学院胡远扬教授提交保藏。SDM细胞是一株昆虫细胞,主要用于昆虫病毒的扩增及相关的研究等。
    细胞污染:HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。
    培养条件:Grace's Insect Medium, Supplemented +10%FBS
    传代方法:1:3传代,2-3天传一代
    细胞冻存步骤:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。明舟生物按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
    复苏细胞步骤:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
    细胞传代步骤:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
    冻存条件: 基础培养基+8%DMSO+20%FBS 

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    相关实验
    • Nature:哈佛大学董民团队利用昆虫细胞全基因组 CRISPR 筛选,揭示杀虫毒素受体

      细菌蛋白毒素是很多致病菌的主要武器,例如白喉毒素,炭疽毒素,肉毒杆菌毒素等等。近年来,全基因组 CRISPR/Cas9 筛选技术在哺乳动物细胞上得到广泛应用,成为研究这些针对人和动物的毒素和病原菌的主要实验方法。昆虫是地球上种类最繁多的动物,在整个生态链上起到至关重要的作用。在自然界中,存在许多专门靶向昆虫的细菌蛋白毒素, 有些已经被广泛地应用于农业害虫防治 。 现有的 CRISPR-Cas9 筛选技术依赖针对哺乳动物细胞的慢病毒转染系统,不适用在昆虫细胞上,大大限制了人们对针对昆虫的蛋白

    • 如何使昆虫细胞适应新的培养液

      细胞。 细胞的生长参数 1 .翻倍时间( Doubling Time ) 细胞的翻倍时间在评价昆虫细胞健康程度的参数中是最容易测量的。翻倍时间应该在细胞处于对数期复制时测量,对于 Sf9 和 Sf21 细胞来说通常是介于 16-24 小时之间,不过大多数在 20-22 小时。 dt=t × ln2/ln(Ct/Co) ,其中 dt 为翻倍时间, Co 为起始细胞数目, Ct 为经过时间 t 后的细胞数目, t 为 Co 和 Ct 两次计数之间的间隔时间,所有的时间都以小时为单位

    • 昆虫细胞的培养液适应

      第一阶段: 1.准备合适体积的由25%体积新培养液和75%旧培养液(即细胞原先适应的培养液)组成的混合培养液I。 2.将细胞以通常分装时使用的最低分装密度的两倍分装到混合培养液I中。 3.使细胞生长到通常培养时的较高密度,监测细胞生长参数。 4.继续以步骤2中的密度分装细胞到新鲜的混合

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