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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
SHCC
- 库存:
100
- 供应商:
赛泓瑞生物
- 细胞类型:
LS 174T [LS174T]细胞
- 运输方式:
干冰/常温
- 年限:
10年
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
1*10^6cell/T25
| 种属 | 人 |
| 别称 | Ls174T; LS174t; Ls-174-T; LS-174-T; LS 174 T; LS-174T; Ls-174T; LS 174T; LS-174; LS174 |
| 组织来源 | 结直肠 |
| 疾病 | 结直肠腺癌 |
| 传代比例/细胞消化 | 1:2-1:3传代,消化2-3分钟, |
| 完全培养基配置 | MEM培养基;10%胎牛血清;1%双抗 |
| 简介 | LS 174T是LS 180 (ATCC CL 187)结肠腺癌细胞株的胰蛋白酶化变种。 它比亲本更易传代,象LS 180一样生成大量的癌胚抗原(CEA)。 电镜研究表明有丰富的微丝和细胞质粘液素液泡。 直肠抗原3阳性。 p53抗原表达阴性,但mRNA表达阳性。 与ATCC CL-187来源于同一个肿瘤。LS 174T细胞角蛋白染色阳性。 癌基因c-myc, N-myc, H-ras, N-ras, Myb, 和 fos的表达呈阳性。 癌基因k-ras和sis的表达未做检测。 |
| 形态 | 上皮细胞样 |
| 生长特征 | 贴壁生长 |
| 倍增时间 | ~48h |
| 基因表达 | carcinoembryonic antigen (CEA), interleukin 10 (IL-10), interleukin 6 (IL-6), mucin The production of CEA in the ATCC seed stock was 1944 ng per 10^6 cells in 10 days. |
| 抗原表达 | serologically defined colon cancer antigen 3; Homo sapiens, expressed HLA A2, B13, B50; Blood TypeO |
| 致瘤性 | Yes, in nude mice (Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells). |
| STR | Amelogenin:X;CSF1PO:10,14;D13S317:10;D16S539:11,13;D18S51:11,13;D19S433:14,15;D21S11:29,31;D2S1338:18,22;D3S1358:15,17;D5S818:11,15;D7S820:OL,11;D8S1179:12,16;FGA:21,22;TH01:6,7;TPOX:8,9;vWA:15,17; |
| 培养条件 | 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。 |
| 冻存条件 | 冻存液:90%FBS,DMSO 10%, 或使用非程序冻存液 |
| 保藏机构 | ATCC; CL-188 |
| 产品使用 | 仅限于科学研究,不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。 |
细胞培养操作
1)复苏细胞:将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
- 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
- 加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02%EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3 min(视细胞情况而定),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。
- 将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。
a、收集细胞,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
南京赛泓瑞生物科技有限公司专注于是一家专注于研发和生产原代细胞、肿瘤细胞及细胞培养相关试剂产品的生物高科技企业,可以为各类研究机构提供符合标准规范的原代细胞、肿瘤细胞及相关实验技术服务;
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文献和实验chuenshui 细胞株:LS 174T 来源:中科院上海细胞库 培养基 :DMEM 10%小牛血清 问题:刚买回来时传代2次,都没问题。扩大培养时发现,细胞养起来时培养基发紫,0.25%胰酶消化传代,24小时候细胞50%不贴壁,细胞还呈发亮状态。 尝试解决办法:更换培养基,10小时后培养基发紫,细胞依然呈漂浮状态。无解决现象。 请问有什么办法可以解决,培养箱应该没问题,箱子里有同时培养的其他细胞,无异
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