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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
SHCC
- 库存:
100
- 供应商:
赛泓瑞生物
- 细胞类型:
MKN-28(MKN-74)细胞
- 运输方式:
干冰/常温
- 年限:
10年
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
1*10^6cell/T25
| 产品名称: | MKN-28(MKN-74) |
|---|---|
| 商品货号: | SHC-1285 |
| 中文名称: | 人胃癌细胞 |
| 规格: | T25 |
| 形态特征: | 上皮细胞样 |
| 生长特性: | 贴壁生长 |
| 细胞污染: | HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 培养条件: | RPMI1640+10%FBS |
| 传代方法: | 1:2传代 |
| 冻存条件: | 无血清细胞冻存液 |
| 细胞传代步骤: | 如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
| 细胞复苏步骤: | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞冻存步骤: | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例;1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |








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文献和实验所需的时间就比夏天要长的多。SGC-7901胃癌细胞的消化传代大致步骤同上,但胰酶作用的时候应放在培养箱中,夏天0.1%的胰酶消化2分钟左右就够了,但冬天差不多要8分钟左右MDA-MB-231乳腺癌细胞消化传代基本同MKN-28,只是消化时间可稍长一点,1分钟左右。
,从肿瘤组织中分离SP细胞有可能为分离鉴定肿瘤干细胞提供一条捷径。目前已从多种肿瘤类型如AML[26]、乳腺癌[27]和脑胶质瘤[1]、肾癌[28]等以及近40种恶性肿瘤细胞株[见表1]中分离得到相应SP细胞,提示肿瘤SP细胞可能是恶性肿瘤存在的一个较普遍现象。 研究发现,肿瘤SP细胞具备多种干细胞样特征。Kondo [29]等发现小鼠C6胶质瘤细胞株含有0.4%SP细胞,体外培养时既能产生SP也能产生非SP细胞,裸鼠移植后,SP 细胞在体内同时分化产生神经元细胞和胶质细胞。Haraguchi[30
癌 CHMas 肥大细胞白血病 SGC-790 胃腺癌 HEL 红细胞白血病 (Erythroleukemia) BGC-823 低分化胃腺癌 HL-60 原髓细胞白血病 (Promyelocytic lenukemia) MKN-45 低分化胃癌 K562 慢性髓原白血病 (chronic myelogenous leukemia) LoVo 结肠腺癌 Hut-78 皮肤T细胞淋巴瘤 Ls-174-T 结肠腺癌 Hut-102 皮肤T细胞
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