- ￥900
- SHBio
- 进口
- SHC3084
- 2025年07月11日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
SHCC
- 库存：
100
- 供应商：
赛泓瑞生物
- 细胞类型：
人结直肠癌细胞RFP荧光稳转株
- 运输方式：
干冰/常温
- 年限：
10年
- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 规格：
1*10^6cell/T25
| 产品名称： | HCT116/RFP |
|---|---|
| 商品货号： | SHC-3248 |
| 中文名称： | 人结直肠癌细胞RFP荧光稳转株 |
| 细胞污染： | HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 培养条件： | MCCOYS 5A MED MOD+10%FBS |
| 细胞冻存步骤： | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。明舟生物按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
| 复苏细胞步骤： | 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞传代步骤： | 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
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文献和实验藤红素和 19-048 治疗后能抑制结直肠癌细胞的增殖以及降低细胞活力。为了确定雷公藤红素和 19-048 是否通过靶向 PRDX1 影响细胞氧化还原状态，作者在 SW620 和 HCT116 细胞中用 DCFH-DA 荧光探针染色检测 ROS 水平，在不同浓度的雷公藤红素和 19-048 处理后，与对照相比，细胞中的 ROS 含量急剧升高，随后检测了雷公藤红素和 19-048 对 NCM460 细胞中 ROS 水平的影响，结果表明，雷公藤红素和 19-048 对正常细胞 ROS 诱导的影响小于癌细胞
，无法达到持续表达外源基因的目的。一般用转染试剂进行质粒转染，多是瞬时转染。非常好，你能区分什么时候需要构建稳转株吗？细胞：需要构建稳转株的，有这些类型：1. 长期在目的细胞中研究基因功能；2. 部分蛋白半衰期极长，瞬时 RNA 只能干扰表达，无法去除已经表达的目的蛋白，想要实现更好的基因干扰效果；3. 想要实验更精准，筛选拷贝数适量的细胞进行实验研究；4. 需要用诱导表达系统的，主要是一些致死基因或者是需要时空表达的；5. 需要用细胞做动物实验的，比如裸鼠成瘤等。以下实验就不需要构建稳定
Nature 三连发：竞争消除，有你没我，论癌细胞的「霸道行为」
2Onco 系统，Red2Onco 能够使得癌基因在红色荧光蛋白 (Red Fluorescent Protein, RFP+) 标记的克隆中特异性共表达。 图片来源: Nature接下来，研究人员借助 Red2Onco 系统研究了肠道干细胞中的突变克隆是否影响相邻隐窝中野生型克隆的命运。结果发现，突变细胞能够介导野生型细胞动力学的变化，同时，接近突变隐窝的野生型克隆显示出加速漂移，大大超过远端野生型隐窝。 图片来源: Nature随后，为了明确突变克隆是对野生型克隆串扰的机制，他们利用 Red
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